植物青枯病原细菌胞外蛋白相关基因的克隆

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘焕利

作者: 何礼远;毛国璋;康耀卫

作者机构:

关键词: 马铃薯青枯菌;胞外蛋白;转座子诱变;基因克隆

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 1999 年 29 卷 02 期

页码: 110-114+119

收录情况: 北大核心

摘要: 用含有转座子Tn5 的铜绿假单胞杆菌PAO1826(pMO75 ∷Tn5 ,Kmr) 诱变我国马铃薯青枯菌小种3 号菌株PO41 ,获得6000 多个胞外多糖正常产生的接合子。经SDSPAGE 电泳,筛选出2 个胞外蛋白减少9 种的突变株PM2644 和PM239 ,其可以引起烟草叶片典型的过敏性反应,致病力比野生型菌株显著降低,皆为原养型菌株。Southern 杂交的结果表明,突变株染色体上只有1 个转座子插入位点。标记交换证明,9 种胞外蛋白缺失与转座子插入相偶联的频率为100 % 。以聚半乳糖醛酸酶和内葡聚糖酶2 种胞外酶为指示蛋白进行定量测定的结果表明,在突变株上清液中和菌体细胞内都没有这2种胞外酶的存在。以突变株PM2644 为受体菌,通过基因功能互补的方法,从野生型青枯菌基因文库筛选到2 个阳性克隆pPSP1 和pPSP2 ,它们既能恢复2 个突变株产生胞外蛋白的能力,也能将2 个突变株的致病力恢复到接近野生型菌株的水平。

分类号: S432.42

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