小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 祁光宇

作者： 祁光宇;刘斌;陈晓宇;王赛错;苟慧天;黄银君;穆克斌;刘学荣

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;N1-N5基因;搭桥PCR;原核表达;可溶性;SDS-PAGE;Western-blot

期刊名称： 东北农业大学学报

ISSN： 1005-9369

年卷期： 2013 年 44 卷 09 期

页码： 86-90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接,经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,构建pET-32a-N1-N5质粒。将pET-32a-N1-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达,将纯化重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明,所表达蛋白以可溶性形式表达并具有能与PPRV阳性标准血清发生特异性反应,为建立快速检测小反当兽疫病毒抗体水平诊断方法奠定基础。

分类号： S852.65

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