人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘明军

作者： 刘明军;武坚;李文蓉;黄俊成;杨冬梅;玛依拉;郭志勤

作者机构：

关键词： 人胰岛素原;羊乳球蛋白;转基因;乳腺表达

期刊名称： 草食家畜

ISSN： 1003-6377

年卷期： 2001 年 S2 期

页码： 179-185

摘要： 从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构 ,能够调控外源基因在乳腺表达

分类号： R346

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