二月兰SSR-PCR反应体系的优化及引物筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贾新平

作者： 贾新平;孙晓波;梁丽建;苏家乐;邓衍明

作者机构：

关键词： 二月兰;SSR-PCR;反应体系;引物筛选

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2017 年 33 卷 05 期

页码： 40-46

摘要： 为建立适合二月兰的SSR-PCR反应体系,采用正交试验设计方法对影响二月兰SSR反应体系的5个因素(DNA模板、Mg~(2+)、d NTPs、引物和Taq聚合酶)进行优化试验,筛选出每个因素的最佳水平。结果表明,10μL反应体系中,Mg~(2+)浓度2.0 mmol/L,d NTPs浓度0.4 mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,DNA模板量20 ng,Taq聚合酶量0.6 U。以3份二月兰基因组DNA为模板,利用优化后的SSR-PCR反应体系进行引物筛选,从50对SSR引物中成功筛选出扩增条带清晰、具有多态性的引物有12对,证明该反应体系具有较好的稳定性和通用性。研究建立和优化的二月兰SSR-PCR反应体系,为进一步利用SSR标记技术开展二月兰分子生物学研究提供了理论依据和技术参考。

分类号： S681.9

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