猪全血中IFN-γ、IL-2、TNF-α TaqMan定量RT-PCR方法的建立及对猪瘟疫苗的免疫评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 汪志艳

作者： 汪志艳;刘永刚;王刚;石文达;武嘉男;涂亚斌;姜成刚;何玉利;韩梓峰;李玉明;王延群;蔡雪辉

作者机构：

关键词： 全血;细胞免疫评价;IFN-γ、IL-2、TNF-α;TaqMan定量RT- PCR;猪瘟活疫苗

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 2 期

页码： 164-168

收录情况： CSCD

摘要： 为建立猪相关细胞因子的检测方法，本研究针对GenBank中猪IFN-γ、IL-2、TNF-α的基因设计特异性引物和荧光探针，建立了这3种细胞因子TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明，建立的检测方法在10~1～10~9拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系，相关系数R~2均高达0.999。利用该方法对猪瘟(CSF)活疫苗进行细胞免疫评价，结果显示，CSF疫苗免疫组猪瘟病毒(CSFV)刺激细胞相对于空白对照细胞，IFN-γ、IL-2、TNF-α mRNA表达量在免疫后3 d～10 d之间均显著升高(p<0.05)，而IFN-γ在14 d仍保持高水平表达；对照组CSFV刺激细胞和空白对照细胞的3种细胞因子表达量均无明显差异(p>0.05)。以上结果表明，该方法具有高度的特异性、敏感性和重复性，对不同疫苗的细胞免疫反应评价是可靠的。

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[1]猪全血中IFN-γ、IL-2、TNF-αTaqMan定量RT-PCR方法的建立及对猪瘟疫苗的免疫评价. 汪志艳,刘永刚,王刚,石文达,武嘉男,涂亚斌,姜成刚,何玉利,韩梓峰,李玉明,王延群,蔡雪辉. 2013

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