利用酵母双杂交系统筛选花生AhCaM相互作用蛋白
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨莎
作者: 杨莎;李燕;郭峰;张佳蕾;孟静静;李萌;万书波;李新国
作者机构:
关键词: 花生叶片cDNA文库;AhCaM;泛素;酵母双杂交系统;蛋白质相互作用
期刊名称: 作物学报
ISSN: 0496-3490
年卷期: 2015 年 41 卷 07 期
页码: 1056-1063
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: CaM是目前已知的胞内Ca2+受体蛋白中最重要的一种,参与多种生理活动的调节。为深入研究CaM蛋白的作用机制,探索其在花生钙信号途径中的作用靶点,用花生CaM基因构建了既无自激活性又无毒性的p GBKT7-AhCaM诱饵表达载体;同时从花生叶片组织中提取总RNA,分离得到mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链cDNA后建立花生叶片cDNA文库;通过共转化法筛选与CaM相互作用的蛋白,并对阳性克隆分析和鉴定,筛选到5个与Ah CaM互作的蛋白,其中NAD激酶是已知能与钙调素互作的蛋白;而泛素能与AhCaM互作,说明AhCaM在花生发育及抗逆方面起作用。通过分析这些靶蛋白的已知功能,为研究AhCaM的未知生物学功能提供了重要信息。
分类号: S565.2
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