西葫芦ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郭秀霞

作者: 郭秀霞;李灵芝;马太光;雷逢进;张瑞腾;李海平

作者机构:

关键词: 西葫芦;ISSR-PCR;正交设计;引物筛选

期刊名称: 山西农业科学

ISSN: 1002-2481

年卷期: 2017 年 45 卷 03 期

页码: 325-327+331

摘要: 为了确定西葫芦ISSR-PCR的最佳反应体系,以西葫芦基因组DNA为模板,采用正交试验方法,对模板DNA、引物及2×Taq PCR Master Mix的用量进行了优化,并通过梯度PCR确定不同引物的最佳退火温度。结果表明,最佳反应体系为:在20μL的体系中,模板DNA(50 ng/μL)1 L,引物(10μmol/L)3 L,Master Mix 10μL;利用该体系从50条ISSR引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物。这一体系的建立及引物筛选为以后利用ISSR分子标记技术对西葫芦进行研究提供了科学依据。

分类号: S642.6

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