CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘畅
作者: 刘畅;逄春华;刘存;王静;刘琪;梁琳;袁维峰;钱爱东;崔尚金
作者机构:
关键词: 多重PCR;犬瘟热病毒;犬细小病毒;犬腺病毒Ⅱ型;犬副流感病毒
期刊名称: 中国动物检疫
ISSN: 1005-944X
年卷期: 2017 年 34 卷 11 期
页码: 89-93
摘要: 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
分类号: S852.65
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