酿酒酵母脂肪酶基因TGL3的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈英

作者： 卢福芝;曾丽娟;朱绮霞;张搏;韦宇拓;黄日波

作者机构：

关键词： 酿酒酵母;脂肪酶;基因克隆;毕赤酵母;表达

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2010 年 20 卷 03 期

页码： 20-22

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:克隆Saccharomy cescerevisiae脂肪酶基因,并实现其在Pichia pastoris中高效表达。方法:根据NCBIGenBank中已公布的Saccharomyces cerevisiae脂肪酶基因TGL3设计引物,以Saccharomyces cerevisiae总DNA为模板,PCR扩增目的片段,构建重组子pPIC9K-TGL3,转化到Pichia pastoris GS115。结果:扩增得到1929bp的基因片段,与GenBank中公布的序列氨基酸同源性达99.7%,编码的643个氨基酸中有脂肪酶的保守序列GXSXG,位于235～239位。重组子摇瓶发酵120h发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,酶学性质研究表明:该酶的最适作用温度为40℃,在25℃～40℃之间能保持60%以上酶活力。最适pH值为8.5,在pH6.5～9.0之间能保持50%以上的酶活力。除Al3+和Fe2+外,该酶不受Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+、Ni+、Sr2+等多种金属离子的影响。结论:发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,是原菌株的10倍,成功实现了该基因的高效表达。

分类号： Q785

  • 相关文献

[1]嗜热真菌NeosartoryafischeriP1脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质分析. 孙乔乔,谭笑,吕依,黄火清,张会图,路福平. 2014

[2]嗜热真菌Neosartorya fischeri P1脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质分析. 孙乔乔,谭笑,吕依,黄火清,张会图. 2014

[3]环境基因组DNA脂肪酶基因克隆与分析. 张银波,江木兰,万霞,王汉中. 2010

[4]粘质沙雷氏菌脂肪酶基因的克隆表达和酶学性质的研究. 陈英,张搏,黄日波. 2010

[5]短小芽孢杆菌HZbp脂肪酶基因的克隆表达. 朱绮霞. 2010

[6]乳酸克鲁维酵母Cu/Zn-SOD基因的克隆及在酿酒酵母中的表达研究. 季静,王罡,牛宝龙,王海勇. 2010

[7]多基因串联表达木糖发酵工程菌株的构建. 陆亮,叶凯,刘敏,于孟斌,陈高云,涂振东. 2013

[8]花生脂肪酶基因的克隆分析及表达研究. 肖寒,夏晗,李军,周凤珏,刘学英,万书波,王兴军. 2013

[9]来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定. 郑小梅,伍宁丰,范云六. 2012

[10]茶尺蠖脂肪酶合成基因EoL2的克隆和组织表达特征. 杜琴,辛肇军,杨子威,李喜旺,陈宗懋,孙晓玲. 2015

[11]白地霉ch-3脂肪酶Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达. 付建红,姚斌,杨浩萌,欧阳平凯,石玉瑚. 2008

[12]真菌的耐盐基因挖掘与棉花的耐盐性改良研究. 叶武威,穆敏,王俊娟,王德龙,张慧军,阴祖军,樊宝相,王帅,郭丽雪. 2016

[13]大菱鲆红体病虹彩病毒主要衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的重组分泌表达. 吴成龙,史成银,黄倢,孔晓瑜. 2009

[14]毕赤酵母表达猪胃蛋白酶的研究. 刘西梅,安立国,乔宪凤,唐青海,华文君. 2008

[15]一个外切菊粉酶基因的克隆表达及酶学性质. 王成华,陆雁,王青艳,申乃坤,黄日波. 2013

[16]猪带绦虫未知基因SLCIO在毕赤酵母中的表达. 王颖,骆学农,郑亚东,马全英,丁军涛,景志忠,才学鹏. 2008

[17]鸡β防御素1基因密码子优化及其在真核细胞中的表达. 单艳菊,胡艳,徐文娟,束婧婷,朱春红,李慧芳,陈宽维. 2012

[18]新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin在毕赤酵母中的表达. 张丽娟,吴唯维,李素一,陈华,柯翎,陈叙,林晨韬. 2021

[19]柔嫩艾美耳球虫表面抗原基因sag10在Pichiapastoris中的表达及鉴定. 韩德强,丁宏标,乔宇,索勋,郝永清. 2006

[20]毕赤酵母Mut~+和Mut~s重组子表达美洲商陆抗病毒蛋白基因的比较. 王锡锋,李莉,周广和,高必达. 2003

作者其他论文 更多>>

微信小程序