猪γ干扰素的表达及抗病毒活性研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 梁望旺
作者: 梁望旺;周丹娜;杨克礼;刘泽文;段正赢;邓均华;郭锐;袁芳艳;徐涤平;田永祥
作者机构:
关键词: 猪γ干扰素;克隆;原核表达
期刊名称: 湖北农业科学
ISSN: 0439-8114
年卷期: 2011 年 50 卷 11 期
页码: 2283-2286
收录情况: 北大核心
摘要: 利用RT-PCR技术从有丝分裂原刀豆素(ConA)诱导的长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出猪γ干扰素的成熟肽基因(mPoIFN-γ),并将其亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-mPoIFN-γ。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot检测,表明猪γ干扰素获得了高效表达,并具有免疫活性,表达产物约为20.5 kDa,主要以包涵体形式存在,产物经纯化、复性得到具有生物学活性的蛋白。利用细胞病变抑制法对其在H-PRRSV/Marc-145系统上进行抗病毒活性测定,结果表明其抗H-PRRSV活性为7.68×103 U/mg。为进一步研究猪γ干扰素功能奠定了基础和理论依据。
分类号: S852.4`S828
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