植物组织和单头蚜虫中柑橘衰退病毒的快速分子检测技术

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘永清

作者： 刘永清;曹孟籍;王雪峰;李中安;唐科志;周常勇

作者机构：

关键词： 柑橘衰退病毒;分子检测;植物组织;单头蚜虫

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2010 年 43 卷 07 期

页码： 1397-1403

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探寻一种快速、简便、灵敏而可靠的检测植物组织和单头蚜虫中柑橘衰退病毒的方法。【方法】运用反转录多聚酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、反转录巢式多聚酶链式反应(reverse transcription nested polymerase chain reaction,RT-nested-PCR)、印记捕获反转录巢式多聚酶链式反应(print capture reverse transcription nested polymerase chain reaction,PC-RT-nested-PCR)方法检测接种Citrus tristeza virus(CTV)四年以上的柚以及采用挤压捕获反转录巢式多聚酶链式反应(squash capture reverse transcription nested polymerase chain reaction,SC-RT-nested-PCR)检测单头蚜虫中CTV,并比较几种方法的检出率、灵敏度以及SC-RT-nested-PCR方法的有效性。【结果】对染病柚的总核酸或印迹稀释后检测,RT-PCR、RT-nested-PCR、PC-RT-nested-PCR的检测限分别为10-3、10-5和10-1倍。用质粒梯度稀释后模板进行nested-PCR检测,灵敏度达到13-14拷贝·μL-1。饲毒一周后的蚜虫经SC-RT-nested-PCR检测,除在健康琯溪蜜柚上饲喂的蚜虫未检测到目标条带外,其余在感病琯溪蜜柚上饲喂的蚜虫体内都获得132bp的目标片段。【结论】PC-RT-nested-PCR和RT-nested-PCR方法具有相同的检出率,SC-RT-nested-PCR检测单头蚜虫非常有效,PC-RT-nested-PCR和SC-RT-nested-PCR都勿需提取核酸,适用于柑橘苗木和接穗的无毒认证以及柑橘衰退病的流行监测和蚜传机理研究。

分类号： S436.66

  • 相关文献

[1]贺兰山西坡草地植物多样性与其叶片C∶N∶P计量比的关系. 江世高,尚振艳,牛得草,张宝林,张斯莲,傅华. 2014

[2]一种高效提取植物不同组织RNA的方法. 任杰,徐秀红,张素丽,冷平. 2011

[3]盐处理下植物组织中甜菜碱和脯氨酸的HPLC-ESI-MS分析. 赵勇,翁跃进,杨春丽. 2004

[4]10种植物组织不同浸出物对苹果腐烂病菌的抑制作用. 孟晶岩,王贤萍,安鸣. 2005

[5]植物组织双向电泳样品制备方法研究进展. 李德军,邓治,陈春柳,陈守才. 2009

[6]0.14％MCP可湿性粉剂对菠菜保鲜效果试验. 王福建,李宝聚,石延霞,陈立芹. 2002

[7]多基因融合表达载体的构建及对烟草的遗传转化. 郎志宏,李艳萍,李国勋,黄大昉. 2009

[8]图像配准方法及其在植物组织三维重建中应用研究进展. 王炎玲,杜建军,郭新宇. 2013

[9]单细胞转录组测序在植物组织发育研究中的应用. 苗龙,汪文辉,何艮华,李佳佳,高慧慧,王晓波,邱丽娟. 2023

[10]超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法同时测定植物组织中多种激素. 王日升,何龙飞,王萌,赵虎,吴星,何志. 2016

[11]感染CTV甜橙中挥发性成分的分析及萜类合成相关基因的表达变化. 王欢欢,赵恒燕,陈琪,刘露勤,张耀海,周彦,刘金香. 2023

[12]柑橘三种蚜虫取食行为的EPG分析. 何应琴,陈文龙,鲁卓越,周常勇,李中安,李太盛. 2015

[13]T3基因型柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立及应用. 陶珍珍,李中安,贾敏,唐萌,唐科志,周常勇,周彦. 2015

[14]果树病毒载体研究进展. 周彦. 2014

[15]中国野生柑橘上衰退病毒分离株分子特征分析. 易龙,周常勇,周彦,王志刚,唐科志. 2007

[16]基于p23基因的野生柑橘和栽培柑橘上衰退病毒分离株间的遗传特征分析. 易龙,周常勇. 2017

[17]柑橘衰退病毒弱毒株筛选方法研究进展. 唐萌,金鑫,周彦. 2015

[18]胡柚上柑橘衰退病毒的分子检测. 武晓云,刘琦,郭玉双,武小霞. 2011

[19]柚新老枝叶中柑橘衰退病毒的DTBIA检测. 宋震,邹敏,徐小峰,唐科志,刘英,周常勇. 2005

[20]重庆柑橘主产区衰退病毒组群分析. 李小松,周彦,周常勇,吕婵娟,王志刚. 2006

作者其他论文 更多>>

微信小程序