基于沙门菌转录因子RipR的衣康酸检测方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 范修齐

作者： 范修齐;王志豪;孔兰芳;鲁壮壮;蒋蔚;陈兆国;韩先干

作者机构：

关键词： 衣康酸;沙门菌RipR;荧光报告基因;检测方法

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年 33 卷 004 期

页码： 104-110

摘要： 衣康酸是由巨噬细胞通过炎症刺激促使顺乌头酸脱羧酶生成，衣康酸具有免疫调节、抗氧化、抗炎和杀菌作用，开展衣康酸检测方法研究，是研究其调控作用的关键。沙门菌转录因子RipR(STM3121基因编码)可通过结合STM3121启动子抑制其转录活性，而RipR与衣康酸结合后可解除其抑制作用。基于此调控方式，可将表达绿色荧光蛋白的报告基因AmCyan、STM3121及其启动子3个元件串联后构建衣康酸检测质粒，通过检测AmCyan的转录活性，可实现对衣康酸的定性检测。因此，本研究首先通过重叠PCR技术，将AmCyan、STM3121及其启动子序列克隆至pACYC184质粒中，成功构建衣康酸检测质粒pACYC184-STM3121-AmCyan。其次，为了评价该质粒对衣康酸的检测作用，将其转化DH5α，成功获得DH5α-pACYC184-STM3121-AmCyan衣康酸检测模型菌株。最后，向该模型菌株分别添加外源和内源性(大肠杆菌感染RAW264.7巨噬细胞后的细胞裂解液)2种方式产生的衣康酸，验证该质粒对衣康酸的检测作用。结果表明，二者均可成功诱导DH5α-pACYC184-STM3121-AmCyan模型菌株产生绿色荧光，而对照组不产生。本研究成功建立衣康酸检测方法，为后续开展衣康酸生物学功能研究提供技术支撑。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]淀粉接枝衣康酸/丙烯酸高吸水材料制备与性能. 栗海峰,范力仁,罗文君,宋吉青,李茂松,潘亚平. 2008

[2]马铃薯X病毒研究进展. 陈虞超,聂峰杰,张丽,巩檑,甘晓燕,石磊,宋玉霞. 2016

[3]紫苏叶中甲胺磷的残留检测方法. 赵云,秦信蓉,赵利晖,熊方宇. 2015

[4]清镇市某奶牛场牛结核的检测与净化. 吴位珩,宋大书,田孟林,杨莉,杨茂生,孙启跃,徐景峨. 2014

[5]茶叶咖啡碱检测方法-紫外分光光度法的改进与探讨. 刘晓霞,周国兰,何萍,郑文丽,赵华富. 2010

[6]浅谈土壤常规检测中的几个关键环节. 林媚. 2017

[7]牛病毒性腹泻流行现状的研究. 姜玲玲,周思旋,史开志,徐洪忠. 2014

[8]鸡T淋巴细胞功能的检测方法研究进展. 刘胜旺. 2000

[9]新农药米满、锐劲特在甘监上的残留试验. 段婷婷,陈才俊,秦立新,廖国会,陈湘燕. 2006

[10]稻茬免耕油菜除草剂在土壤中的消解动态. 段婷婷,魏进,叶照春,何永福. 2013

[11]氨基糖苷类药物的危害及其检测方法研究进展. 高月,王耀,胡骁飞,邓瑞广,侯玉泽. 2016

[12]马铃薯黑痣病多重实时定量PCR检测方法的建立. 陈恩发,卢扬,彭慧元,雷尊国,邓宽平. 2014

[13]DP-305423转基因大豆PCR检测方法研究. 吕智超,李飞武,周宁,闫伟,王丕武,张明. 2011

[14]HPLC-VWD法测定猪粪中喹乙醇的残留. 李维,王冉,魏瑞成,张宁,王恬. 2009

[15]进口大豆中菜豆晕疫病菌巢式PCR检测方法的建立. 杨万风,刘艳,刘翔,邵沛泽,谌运清,赵文军. 2015

[16]黄曲霉毒素B1检测方法的分析. 叶雪珠,王小骊,赵燕申,董秀金. 2003

[17]食品中二氧化硫的来源与检测方法. 尹洁,朱军莉,励建荣. 2009

[18]2,4-二硝基氟苯柱前衍生RT-HPLC法测定γ-氨基丁酸. 郑洪健,叶立斌,励建荣,韩晓祥. 2011

[19]巢式PCR检测菜豆细菌性萎蔫病菌. 杨万风,刘艳,刘翔,邵沛泽,谌运清,赵文军. 2015

[20]油菜品质分析比对检测及方法. 王宁惠. 2008

作者其他论文 更多>>

微信小程序