加州鲈卵泡抑素cDNA的克隆、分析和原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李胜杰

作者： 李胜杰;白俊杰;叶星;劳海华;简清

作者机构：

关键词： 加州鲈;卵泡抑素;克隆;原核表达

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2007 年 15 卷 05 期

页码： 59-64

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR和RACE技术从加州鲈(Micropterus salmoides)成鱼卵巢总RNA中扩增得到卵泡抑素cDNA。序列分析表明,加州鲈卵泡抑素cDNA全长1444bp,包括开放阅读框966bp,5'非编码区82bp,3'非编码区359bp。该基因编码321个氨基酸,其中信号肽31个氨基酸,成熟肽290个氨基酸。成熟蛋白由4个功能区组成,分别为:N-domain、DomainⅠ、DomainⅡ和DomainⅢ。将加州鲈卵泡抑素氨基酸序列与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、斑马鱼(Danio rerio)、大西洋鲑(Salmo salar)和斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)比较,同源性分别为97%、89%、88%、88%和70%,N-domain氨基酸序列表现出最高的保守性。将成熟肽cDNA插入表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌(Escherichia coli),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,结果检测到预期分子量约52kD的特异蛋白带,Western blot检测到表达产物,表明成功获得了卵泡抑素的融合蛋白。

分类号： S917.4

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