基于重组酶聚合酶扩增技术的犬细小病毒快速检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姜一曈

作者： 姜一曈;王昭华;鑫婷;贾红;郭晓宇;朱鸿飞;侯绍华

作者机构：

关键词： 犬细小病毒;重组酶聚合酶扩增技术;快速检测

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 926-929

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种快速、简便检测犬细小病毒(CPV)的方法,本研究基于CPV VP2基因的保守序列,设计合成引物,通过对反应条件的优化,建立了CPV的重组酶聚合酶(RPA)检测方法。该方法在38℃恒温反应15 min即可快速、特异性的检测出CPV。特异性试验结果显示,除CPV (BJ-2b株、BJ-2c株)外,犬瘟热病毒、犬冠状病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒等检测均为阴性;敏感性试验结果显示,以重组质粒pEASY-CPV-VP2为模板,RPA的检测下限为1×10~1拷贝/μL,其敏感度比普通PCR方法高10倍。利用建立的RPA方法对疑似CPV感染的临床样品的阳性检出率为88%,高于普通PCR的检出率(82%)和胶体金的检出率(76%)。本研究建立的CPV RPA检测方法操作简单,反应灵敏,结果确实可靠,适用于CPV的快速检测。

分类号： S852.65

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