古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 汪秀会
作者: 汪秀会;宫晓倩;刘晓敏;阮宝阳;李泽君;周艳君;童光志;于海
作者机构:
关键词: RT-PCR;H1N1亚型;猪流感病毒;反向遗传;病毒拯救
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2014 年 06 期
页码: 13-17
摘要: 利用RT-PCR技术扩增古典H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/2011株的8个目的基因片段,分别克隆至双向转录表达载体p BD上。将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,48 h后收集上清,接种MDCK细胞。当细胞出现明显病变时,收集MDCK细胞上清,其血凝效价为1:64,与原始野生株血凝效价一致;提取拯救病毒的RNA并进行8个目的片段扩增及序列分析,测序结果显示与野生株病毒相同,表明病毒拯救成功。古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的成功建立,不仅为探索流感病毒致病机理、感染机制及功能研究奠定了基础,同时也为H1N1亚型猪流感病毒新型疫苗的研制开辟了新的途径。
分类号: S852.651
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