牛病毒性腹泻病毒SYBR Green荧光定量PCR方法的建立及其应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘存

作者： 刘存;崔尚金

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;荧光定量PCR方法;检测方法

期刊名称： 现代畜牧兽医

ISSN： 1672-9692

年卷期： 2018 年 12 期

页码： 9-13

摘要： 为了建立BVDV快速诊断方法,针对BVDV基因组5’UTR序列保守区域设计了荧光定量PCR引物,并建立了快速检测BVDV的荧光定量PCR方法。结果表明,以构建的重组质粒pMD-5’UTR为标准品建立的SYBR Green荧光定量PCR方法标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数达0.997 3;敏感性试验结果显示,该方法敏感性较好,其最低检测下限为10拷贝。重复性试验结果显示,该方法批内和批间的变异系数为均小于5%,表明该方法的重复性良好。特异性试验显示,该方法与牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒不存在交叉反应,但其不可区别鉴定BVDV与猪瘟病毒。应用所建立的SYBR Green荧光定量PCR方法测定非致细胞病变型BVDV(BVDV-BJ-2016株)分离毒株的一步生长曲线,发现在感染后12～48 h为其对数生长期。该研究为研究非致细胞病变型生长特性提供了参考。

分类号： S852.65

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