白背飞虱VAMP7和Vti1a蛋白的原核表达、抗体制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张潇婉

作者： 张潇婉;张璐;刘文文;李莉;王锡锋

作者机构： 植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词： 白背飞虱;囊泡相关膜蛋白7;囊泡转运蛋白;原核表达;Western blot;免疫荧光标记

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 55-60

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 白背飞虱Sogatella furcifera的囊泡相关膜蛋白7（VAMP7）和囊泡转运蛋白（Vti1a）隶属于SNARE（soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor）家族,该家族蛋白主要参与生物体中关键的膜转运过程。前期研究发现这两种蛋白分别与南方水稻黑条矮缩病毒Southern rice black-streaked dwarf virus（SRBSDV）的主要外层衣壳蛋白P10存在显著互作,推测可能协助病毒粒体在介体白背飞虱内的转运和扩散。为了进一步利用血清学技术研究VAMP7和Vti1a在传毒过程中的功能,本研究克隆了白背飞虱编码这两种蛋白的基因,成功构建了VAMP7和Vti1a基因的原核表达载体,并将载体分别转入大肠杆菌中进行诱导表达,得到了相应的原核表达蛋白。在蛋白纯化后,将纯化蛋白注射于新西兰大白兔体内进行免疫,分别制备得到VAMP7和Vti1a的抗体。两种抗体经Western blot检测发现,均可分别与白背飞虱体内的VAMP7和Vti1a特异性结合。利用制备的抗体对白背飞虱的肠道进行免疫标记,激光共聚焦显微镜观察发现所制备抗体能够在白背飞虱中肠上皮细胞的胞质中特异性标记到VAMP7和Vti1a,表明制备的抗体能够成功用于这两种蛋白的体内外检测,为阐明这两种蛋白参与传播SRBSDV的机制研究奠定了基础。

分类号： S435.112.3

  • 相关文献

[1]水稻咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的原核表达、抗体制备和应用. 索青青,吴楠,杨慧,李莉,王锡锋. 2022

[2]灰飞虱VAP-B蛋白的抗体制备及体内外应用. 赵霞,秦发亮,刘文文,王锡锋. 2022

[3]小麦矮缩病毒外壳蛋白基因的原核表达、抗体制备及应用. 任堂雨,刘艳,王锡锋. 2013

[4]小麦TaPDK基因的序列分析、原核表达及纯化. 杨书玲,张龙雨,张改生,桑青,刘红占,朱启迪,张新钵,赵新亮. 2013

[5]木薯14-3-3蛋白家族成员MeGRF3基因的原核表达及多克隆抗体制备. 常丽丽,王丹,彭存智,徐兵强,仝征. 2020

[6]猪流感病毒新型核糖体移码蛋白PA-X特有序列的原核表达、纯化及鉴定. 宫晓倩,阮宝阳,刘晓敏,张鹏,汪琪,汪秀会,周艳君,李泽君,童武,郑浩,童光志,于海. 2016

[7]降解赤霉病菌毒素Tri101基因的原核表达及抗体制备. 闫海霞,杨丽荣,薛保国,段立清,孙虎. 2010

[8]橡胶树肌动蛋白解聚因子原核表达及纯化. 邓治,杜磊,李德军. 2014

[9]牛分枝杆菌MPB83基因的原核表达及免疫活性分析. 张秀华,刘思国,王春来,郭设平,郭洋,邵美丽,宫强,彭永刚,沈国顺. 2005

[10]重组猪戊型肝炎病毒ORF2区主要抗原域的原核表达及鉴定. 于婧,曲娟娟,于敏,赵立平,相文华. 2008

[11]冰冻切片法在植物微管骨架研究中的应用. 李志刚,李素丽,林丽,杨丽涛,李杨瑞. 2008

[12]两种小鼠卵母细胞的核成熟检验方法比较. 王建英,万发春,宋恩亮,张秀美. 2008

[13]类猪圆环病毒P1 VP1蛋白在昆虫细胞中的表达及特性分析. 王凤芝,温立斌,何孔旺,姚火春,王小敏. 2015

[14]甜瓜黄斑病毒外壳蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及其应用. 曾蓉,徐丽慧,高士刚,戴富明. 2017

[15]创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析. 古小莉,李永贤,李惠青,陈洁文,李刘冬. 2017

[16]几种血清学技术在浙贝母花叶病毒(Thunberg fritillary mosaic virus)检测中的应用. 韦传宝,陈炯,郑红英,陈剑平. 2006

[17]苜蓿盲蝽气味结合蛋白Alin OBP3的克隆、表达及结合特性分析. 孙洋,任丽燕,张雪莹,张永军,吴孔明,郭予元. 2010

[18]日本血吸虫四跨膜孤儿受体(TOR)克隆及其第一个膜外区基因的表达. 马帅,韩艳辉,洪炀,张旻,曹晓丹,韩倩,刘艳涛,陆看,马茜茜,陆珂,贾秉光,林矫矫,傅志强. 2014

[19]苜蓿盲蝽气味结合蛋白AlinOBP3的克隆、表达及结合特性分析. 孙洋,任丽燕,张雪莹,张永军. 2010

[20]棉铃虫保幼激素环氧水解酶基因的克隆及其原核表达. 吴孔明,高希武,程红梅. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序