BVDV-2E2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘昱成

作者： 刘昱成;王国超;孟庆玲;乔军;才学鹏;贺志昊;杨海波;万鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： BVDV;E2基因;载体构建;真核表达

期刊名称： 西北农业学报

ISSN：

年卷期： 2014 年 02 期

页码： 30-34

收录情况： CSCD

摘要： 根据GenBank登录的BVDV-2E2基因序列,设计特异性引物,对BVDV-2新疆SW分离株E2基因进行RT-PCR扩增,克隆入T载体中测序,然后亚克隆入华赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,构建重组表达载体pPIC9K-E2。用SalⅠ酶切线性化重组质粒pPIC9K-E2,电转化酵母GS115,通过G418筛选重组酵母菌GS115-pPIC9K-E2,用φ=1.5%甲醇诱导,SDS-PAGE和Westernblot分析表达产物。SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白分子质量为23.2ku;Westernblot分析表明,该重组蛋白可与BVDV-2多克隆抗体发生特异性血清学反应,证...

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