利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼核受体PXR基因初探

文献类型： 中文期刊

第一作者： 成凯

作者： 成凯;冯永永;周莉;李凯彬;聂湘平

作者机构：

关键词： PXR;CRISPR/Cas9;斑马鱼

期刊名称： 中山大学学报(自然科学版)

ISSN： 0529-6579

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 115-122

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 孕烷X受体(Pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族(NRs)中NR1I的重要成员之一,在保护机体免于内源性和外源性物质损伤方面具有重要作用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立PXR基因敲除的斑马鱼模型,为研究环境污染物的毒性机理及代谢过程提供基础模型。根据PXR基因序列,设计gRNA靶位点,体外转录合成gRNA。同时,将设计合成的gRNA与Cas9 mRNA通过显微注射转入斑马鱼受精卵,经孵化、筛选出有效的突变体,并逐代培养杂交筛选出PXR基因敲除突变体。结果表明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除PXR基因,经测序分析获得稳定的PXR(+4/+4)基因纯合体。

分类号： Q78

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