文献类型: 中文期刊
第一作者: 张宁
作者: 张宁;高宏雷;高玉龙;李俊山;冉多良;王笑梅
作者机构:
关键词: 传染性法氏囊病病毒;非结构蛋白;VP5;克隆表达;多克隆抗体
期刊名称: 中国生物工程杂志
ISSN: 1671-8135
年卷期: 2006 年 26 卷 10 期
页码: 30-35
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 利用PCR技术,从传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx、Gt毒株中分别扩增出VP5基因,将其克隆到表达载体pET30a、pET28a中。经PCR、酶切和序列分析鉴定获得重组质粒命名为pET28a-GtVP5、pET30a-GxVP5。将pET30a-GxVP5、pET28a-GtVP5分别转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达了约24kDa的Gx-VP5及23kDa的Gt-VP5融合蛋白,它们都以包涵体形式存在。将Gx-VP5纯化后的蛋白免疫8周龄BALB/c雌鼠,ELISA分析表明制备的抗血清效价在1∶25600以上,Westernblot分析VP5表达产物能与抗6×HismAb及抗IBDV多克隆抗血清发生反应,具有良好的免疫反应特异性。
分类号: S852.4`Q819
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