禽流感病毒H5HA、H7HA基因共表达核酸疫苗质粒的构建及其在体外的表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张芳芳

作者: 张芳芳;刘光亮;姜永萍;陈化兰;陈怀涛

作者机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;甘肃农业大学

关键词: 双顺反子;重组质粒;核酸疫苗;真核表达;间接免疫荧光

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2004 年 25 卷 04 期

页码: 107-110

摘要: 为了获得既能对 H5亚型又能对 H7亚型 AIV攻击产生保护的核酸疫苗 ,设计构建了含有双顺反子的真核表达载体 ,用限制性内切酶从 PCIH7HA载体上切得 AIV H7HA基因的c DNA,此 c DNA含有 CMV启动子和 Poly(A)终止序列 ,使用 DNA 连接酶引入载体PCIH5HA中 ,最后获得双顺反子真核表达载体PCI-H5HA-H7HA,其中 H5HA和 H7HA基因都带有自己的 CMV启动子和 Poly(A)终止序列。选用 2 93 -T真核表达细胞系 ,用脂质体转染法导入细胞进行瞬时表达 ,转染后 48h用荧光标记的兔抗鸡 Ig G进行间接免疫荧光试验。结果表明双顺反子真核表达载体构建正确 ,且在真核表达细胞系中 H5HA和 H7HA基因都能获得表达 ,且 H5HA 基因的表达效果优于H7HA。这为进一步的动物免疫试验和疫苗效价检测试验奠定了基础

分类号: S852.659.5

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