MDCK细胞ISG15基因的克隆表达及抗病毒活性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘爱玲
作者: 刘爱玲;潘杰;庞运倩;于可响;马秀丽;宋敏训
作者机构:
关键词: ISG15;MDCK细胞系;抗病毒活性;H9N2
期刊名称: 浙江农业学报
ISSN: 1004-1524
年卷期: 2015 年 27 卷 02 期
页码: 154-159
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了解ISG15基因体外抗病毒机制,应用RT-PCR方法扩增了MDCK细胞的ISG15基因,经测序分析,该基因序列与Gen Bank中登录的犬属ISG15基因序列相似性为99%。将该基因亚克隆至p ET-28a载体构建出重组原核表达质粒p28a-M15;工程菌p28a-M15/BL21经IPTG诱导表达,获得了约22 k D的重组目的蛋白,重组蛋白经Ni2+柱层析纯化。于H9N2亚型禽流感病毒S2株感染前后在MDCK细胞中定量加入纯化的ISG15蛋白,结果显示,病毒感染MDCK细胞前加入ISG15蛋白可以抑制病毒的复制,但病毒感染后添加该蛋白则促进了病毒的复制。
分类号: S855.3
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