薏苡ClVQ12的表达模式、抗旱功能及互作蛋白分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王永乐

作者: 王永乐;路献勇;王红娟;王玉娇;朱加保

作者机构:

关键词: 薏苡;ClVQ12;VQ基因家族;生物信息学分析;抗旱验证;蛋白互作

期刊名称: 江西农业大学学报

ISSN: 1000-2286

年卷期: 2025 年 47 卷 004 期

页码: 865-877

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】薏苡(Coix lacryma-jobi L.)是重要的食药同源作物,干旱和土壤盐碱化对薏苡的产量与品质造成严重威胁,VQ基因家族在植物响应外界胁迫与激素诱导中发挥重要作用,克隆薏苡VQ基因家族成员ClVQ12,并分析其表达模式、抗旱能力及互作蛋白,进一步探究VQ基因在薏苡生长发育和胁迫响应过程中所发挥的功能。【方法】以“皖薏2号”为材料,首先克隆ClVQ12和对其进行生物信息学分析;接着通过亚细胞定位试验确定其位置,使用qRT-PCR分析其在MEJA和ABA诱导、高温胁迫、盐胁迫和干旱胁迫下的表达模式,然后构建ClVQ12基因酵母表达载体并转入酵母,比较转基因酵母和对照酵母在干旱胁迫下的生长差异;并利用酵母双杂试验验证ClVQ12与ClVQs和ClWRKYs之间的相互作用。【结果】成功克隆ClVQ12,该基因开放阅读框长度为579 bp;编码192个氨基酸;等电点为5.06;平均亲水性系数为-0.52,是不稳定的亲水性蛋白;该基因定位于细胞膜和细胞核中;不含有跨膜结构域和信号肽,含有18个磷酸化位点。二级结构主要由不规则卷曲(61.46%)、α-螺旋(32.29%)、延长链(4.17%)和β-折叠(2.08%)组成。启动子顺式作用元件分析发现ClVQ12含有多个响应激素诱导和非生物胁迫的元件。表达模式分析表明,该基因受到MEJA、ABA处理和干旱胁迫的显著诱导,其表达量在高温胁迫和盐胁迫下被显著抑制。与pYES2空载酵母相比,ClVQ12转基因酵母在甘露醇模拟干旱胁迫下具有更高的存活率,生长状况更好。通过酵母双杂试验发现,ClVQ12与ClVQ4、ClVQ11、ClVQ26和ClWRKY51发生相互作用,与ClWRKY5不发生相互作用。【结论】ClVQ12基因具有典型的VQ基因家族特征,定位于细胞膜和细胞核,响应多个激素处理和非生物胁迫。ClVQ12与ClVQs和ClWRKY51发生相互作用,提高转基因酵母的耐旱性。

分类号: S519

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