PMAxx-qPCR定量检测梨火疫活菌方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 韩文超1

作者: 韩文超1;许景升1;黄宏坤2;李志明1;杨晓欣1;徐进1;冯洁1

作者机构:

关键词: 梨火疫病;PMAxx-qPCR检测技术;活菌检测

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2025 年 51 卷 004 期

页码: 290-297

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究将改良的叠氮溴化丙锭(PMAxx)与荧光实时定量PCR技术(qPCR)相结合,开发出一种精准高效、灵敏特异的PMAxx-qPCR检测方法,用于梨火疫病菌Erwinia amylovora活细胞的定量检测。通过控制变量的单因素变化试验对PMAxx预处理体系中的各项参数进行优化,确立了PMAxx终浓度为15μmol/L,黑暗孵育时间为15 min,曝光时间为8 min的PMAxx预处理体系,可有效抑制1.0×10~8 cfu/mL梨火疫死菌的DNA扩增,对梨火疫活菌DNA的扩增无影响。本文开发的PMAxx-qPCR检测技术可于特定范围内有效地排除死菌干扰,适用于菌液浓度在10~3~10~8 cfu/mL范围内的活菌数精准定量。为进一步深入探究梨火疫病的流行规律提供新的技术支持,并有效防止在实际样本的PCR检测中出现假阳性的现象。

分类号:

S432.42

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