双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨敏生

作者： 杨敏生;李志兰;王颖;王进茂;梁海永

作者机构：

关键词： 三倍体毛白杨;双抗虫基因;遗传转化;抗虫性

期刊名称： 林业科学

ISSN： 1001-7488

年卷期： 2006 年 42 卷 09 期

页码： 64-71

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 mg·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18 %,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系。PCR检测表明:80 %的植株呈现阳性反应,部分株系进行Southern Blot检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中。用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明:7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0·016 1 %。用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明:不同株系幼虫杀死率明显不同,有39·3 %的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80 %以上;25·0 %的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60 %~80 %之间;另有35·7 %的株系幼虫死亡率在50 %以下,有些株系基本未表现出抗虫性。同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育。

分类号： S792.11

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