文献类型: 中文期刊
第一作者: 李林凤
作者: 李林凤;浦亚斌;宫雪莲;白春雨;白秀娟;关伟军
作者机构:
关键词: 鸡;鸭;原始生殖细胞;种间嵌合体;转基因鸡;pEGFP-N3
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2010 年 41 卷 01 期
页码: 10-15
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究异种间嵌合体的制作方法及供体和受体的嵌合情况,同时探讨绿色荧光蛋白(pEGFP-N3)基因作为报告基因在转基因动物制作中的应用价值。本研究利用脂质体介导法将外源pEGFP-N3质粒转入到北京鸭原始生殖细胞(PGCs)中,将转染后的PGCs以微注射法转移至受体北京油鸡的胚下腔,探索转基因鸡鸭嵌合体的制作方法。结果显示:PGCs在转染后6 h开始有外源基因的表达,体外培养24 h后获得了33.6%的转染效率。120枚蛋在整个孵化期中共有33枚鸡胚发育,但最终无孵化成活鸡。在13个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为10.8%。PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,8只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞。研究结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因禽类是可行的。鸭PGCs能够迁移并定居到鸡胚性腺中,并有可能在鸡性腺中增殖分化成有功能的配子。
分类号: S831`S834
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