中国小麦花叶病毒(CWMV)外壳蛋白(CP)特异性抗体的制备与应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 沈峥嵘

作者: 沈峥嵘;戴远兴;郭留明;汪芷瑶;张恒木

作者机构:

关键词: 中国小麦花叶病毒;外壳蛋白;重组蛋白;多克隆抗体

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2024 年 36 卷 009 期

页码: 2042-2050

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 中国小麦花叶病毒(CWMV)是浙江省农业科学院发现并鉴定的一种土传病毒,其RNA2编码的外壳蛋白(CP)在病毒侵染过程中发挥重要功能。为了检测该蛋白表达并分析其生物学功能,该研究采用RT-PCR方法从感染CWMV小麦病叶中扩增获得CP基因,并通过In-Fusion技术构建了CWMV CP重组表达载体,将其导入BL21(DE3)菌株诱导表达;原核表达的重组CP蛋白经镍柱亲和层析纯化后注射免疫家兔,收集抗血清经亲和层析纯化获得CP多克隆抗体。Dot-ELISA、ID-ELISA、Western blot显示,该抗体不仅对CWMV具有高度的特异性,而且其效价高达1∶2.048×10~7、灵敏度达6.25×10-2 ng。应用该抗体采用Dot-ELISA、Western blot方法检测田间小麦样品显示其可用于CWMV的准确诊断,这为CWMV病毒病检测、CP定量分析及其功能研究奠定了基础。

分类号: S435.121.4

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