牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白单抗的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于作

作者： 于作;朱远茂;高欲燃;董秀梅;吕闯;薛飞

作者机构：

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒;gE基因;单克隆抗体

期刊名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2010 年

页码： 4

收录情况： CSCD

摘要： 为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究根据GenBank登录的IBRVgE基因序列设计一对特异性引物,扩增出长350bp的gE基因片段,定向克隆到pET-32a(+)表达载体中,然后转化BL21表达菌,经过IPTG诱导表达,获得了可溶性重组gE蛋白。利用Ni柱亲和层析法纯化重组gE蛋白,免疫印迹试验检测证明其具有良好的抗原性和特异性。以纯化的gE蛋白为免疫原,免疫6周龄～8周龄Balb/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,利用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,并对其生物学特性进行研究。结果共获得2株能稳定分泌抗gEMA...

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