两种方法研究不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰效应

文献类型： 中文期刊

第一作者： 肖红卫

作者： 肖红卫;刘中华;刘西梅;郑新民;乔宪凤;李莉

作者机构：

关键词： shRNA表达载体;Vero细胞;脂质体;EGFP表达载体;转染

期刊名称： 江西农业学报

ISSN： 1001-8581

年卷期： 2010 年 22 卷 10 期

页码： 118-121+125

摘要： 目的:旨在观察不同茎部长度串联shRNA表达载体对EGFP基因的干扰作用。方法:采用体外培养的Vero细胞,选用不同茎部长度串联shRNA表达载体+EGFP表达载体+脂质体转染的方法,将构建好的干扰载体转染Vero细胞,然后使用实时荧光定量RT-PCR对其沉默效应进行定量分析。在小鼠腿部肌肉注射干扰质粒,实时荧光定量RT-PCR对其沉默效应进行定量分析。结果:转染Vero细胞时,pGenesilR21、pGenesilR27和pGenesilR29荧光表达量仅为对照质粒pEGFP-C1的4.3%、3.0%和6.9%;小鼠腿部肌肉注射干扰质粒时,pGenesilR21、pGenesilR27和pGenesilR29荧光表达量仅为对照质粒pEGFP-C1的2.5%、1.3%和5.1%。结论:在细胞和个体水平,不同茎部串联干扰载体对目的基因的抑制效应均很明显(达到90%以上),比单一位点产生的沉默效应要强许多,不同茎部长度干扰效应彼此间差异不显著。

分类号： Q786

  • 相关文献

[1]脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化. 邓廷贤,庞春英,张滢寅,杨炳壮,张秀芳,梁贤威. 2013

[2]脂质体介导转染法原理及其研究近展. 周雪雁,关伟军. 2004

[3]小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及其对维持鸡原始生殖细胞未分化状态的影响. 杨娜娜,朱靖,史卫峰,孟春花,杜立新. 2008

[4]pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞条件的优化. 杨娜娜,史卫峰,崔英杰,赵晓民,杜立新. 2007

[5]猪APOBEC3F基因真核表达载体的构建及其在MARC145细胞中的表达定位. 孟春花,王春玲,李静心,李隐侠,朱前明,曹少先. 2015

[6]Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响. 付博,马红,任亮,赵金凤,房庆昌,郭镇华,李忠秋,刘娣. 2010

[7]猪流行性腹泻病毒YL112株的M基因序列分析及其在Vero细胞的传代适应性研究. 蓝日国,张书晴,张金秋,苗晋锋. 2017

[8]无血清微载体培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒. 吴培培,冯磊,唐应华,褚轩,王伟峰,侯继波. 2016

[9]稳定表达犬SLAM受体的Vero细胞系的建立与应用. 朱璐宇,彭丽艳,周雨霞,王喜军,步志高. 2018

[10]传染性法氏囊病病毒Vero细胞培养条件优化的研究. 石岗,王宏俊,孙惠玲,艾国光,王欢,顾铭,聂峰光. 2000

[11]荜拨体外抗新孢子虫的作用. 李璐,王晓岑,张楠,宫鹏涛,李建华,李新,马丹,关贵全,张西臣. 2020

[12]Vero细胞悬浮驯化及增殖鸡传染性支气管炎病毒工艺研究. 程旭,姜逸,高明燕,周生,俞燕,李建梅,沈欣悦,范建华. 2021

[13]水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗保存期试验研究. 柴秀丽,丛丽,闫喜军,吴威,赵传芳,罗国良. 2007

[14]鸭疫里默氏杆菌对鸭胚肝细胞粘附入侵能力的研究. 薛亚飞,宫艳杉,祁晶晶,卜慧敏,杨永胜,陈妍,高萌萌,胡青海. 2019

[15]猪乙脑传代细胞活疫苗(SA14-14-2株)对仔猪的安全性试验. 潘文,韩伟,姜国华,郝霖雨. 2016

[16]绵羊痘病毒E3L基因在Vero细胞中的表达. 于少雄,颜新敏,赵志荀,吴国华,叶奕优. 2014

[17]过表达HDAC6基因的Vero细胞系建立及其对狂犬病病毒增殖效率评价. 殷娟斌,张志雄,王莎莎,马小琴,梁正基,孙跃峰,王相伟,殷相平. 2023

[18]应用生物反应器和微载体培养Vero细胞生产猪流行性腹泻病毒的研究. 王建超,周燕,华平,邹勇,谭文松,钱永清. 2003

[19]Drebrin蛋白对PEDV在Vero细胞中增殖影响的研究. 吕家煌,朱明君,尹力鸿,李天娇,索朗斯珠,李彬. 2022

[20]稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用. 赵建军,闫如勋,张海玲,张蕾,胡博,白雪,邵西群,柴秀丽,闫喜军,吴威. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序