用SSR标记和巢式PCR快速检测大豆疫霉菌

文献类型: 中文期刊

第一作者: 徐静静

作者: 徐静静;蔺宇;董立明;王晓鸣;武小菲;朱振东

作者机构:

关键词: 大豆疫霉菌;SSR标记;分子检测;巢式PCR

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2009 年 42 卷 05 期

页码: 1624-1630

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】建立快速、准确的大豆疫霉菌检测和病害早期诊断分子技术。【方法】基于大豆疫霉菌SSR标记Psc239设计两对引物Psc239EF/Psc239ER和Psc239F/Psc239R,建立特异性检测大豆疫霉菌的巢式PCR方法。【结果】用36个大豆疫霉菌分离物和25个其他卵菌和真菌分离物基因组DNA评价引物及巢式PCR的专化性,引物对Psc239EF/Psc239ER、Psc239F/Psc239R和巢式PCR反应只在大豆疫霉菌中分别扩增出519、242和242bp的特异片段,在其它卵菌和病原真菌中不扩增片段;用两对引物进行常规PCR扩增,检测大豆疫霉菌DNA的灵敏度均为50pg·μl-1,而巢式PCR的灵敏度为50fg·μl-1;巢式PCR检测土壤中卵孢子的灵敏度为每克土壤0.4个卵孢子;巢式PCR能够特异地从大豆病株和土壤中检测到大豆疫霉菌。【结论】基于SSR标记建立的巢式PCR方法能够用于大豆疫霉菌的快速检测和病害诊断。

分类号: S435.651

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