植酸酶转基因猪成纤维细胞系的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈晓亮

作者： 陈晓亮;黄怡;殷丽丽;王士长;林秀坤

作者机构：

关键词： 转基因;植酸酶;慢病毒;流式细胞分选;猪成纤维细胞

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2013 年 44 卷 01 期

页码： 7-14

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在获得对胃蛋白酶和胰蛋白酶具有耐受性的植酸酶转基因猪成纤维细胞系。本研究首先检测了转植酸酶基因的酵母发酵液分别经不同浓度、pH2.0的胃蛋白酶和不同浓度、pH7.0的胰蛋白酶处理后的酶活残余量;然后采用流式细胞术筛选了慢病毒转染的阳性猪成纤维细胞,并进行鉴定。结果表明,酵母粗酶液经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后,残留酶活分别保持在70%和80%以上;包装后的慢病毒滴度为3.75×107,经流式细胞术筛选的转基因细胞阳性率为1.2%,PCR和RT-PCR结果表明,植酸酶基因已整合到基因组上,且该基因在转录水平上表达。本研究为制备植酸酶转基因细胞系提供了一种快速有效的方法,为转基因猪的培育奠定了基础。

分类号： S828

  • 相关文献

[1]转基因对农业生产的贡献-实现绿色养殖和丰富种质资源. 于大伟,王友华,梁成真. 2019

[2]能以植酸磷为唯一磷源生长的转基因甘蓝型油菜. 方小平,王转,陈茹梅,李均,范云六,罗莉霞,陈坤荣,任莉. 2010

[3]组成型表达转植酸酶基因(phy A2)玉米的获得. 张琪,陈茹梅,杨文竹,陈平,薛光行,范云六. 2010

[4]组成型表达转植酸酶基因(phyA2)玉米的获得. 张琪,陈茹梅,杨文竹,陈平,薛光行,范云六. 2010

[5]四环素诱导型单载体的构建、体外表达与鉴定. 乔宪凤,马卓,毕延震,华再东,华文君,肖红卫,周荆荣,郑新民. 2012

[6]7个shRNA分子对绵羊BMPR-1B基因的干扰作用分析. 金贤华,林嘉鹏,白杰,刘晨曦,汪立芹,阿米娜,周川,黄俊成. 2012

[7]绵羊Follistatin基因表达及其结构域的功能分析. 张宁,张雪梅,刘明军,谭立新. 2010

[8]水牛原代体细胞慢病毒感染体系的建立. 段安琴,陆杏蓉,马小娅,梁莎莎,庞春英,梁贤威,邓廷贤. 2019

[9]用于CRISPR文库筛选的N2a-Cas9细胞系的构建. 张纪文,王露露,李芳,刘杏,赵东明,步志高. 2020

[10]绵羊白细胞内的慢病毒cDNA gag基因的PCR检测. 阿依努尔·亚森. 2018

[11]慢病毒介导的bta-miR-222稳定过表达MDBK细胞株的构建及鉴定. 钟纯燕,主性,李基棕,毛立,李文良,郝飞,刘茂军,嵇辛勤,肖芳. 2019

[12]RHBDF2-shRNA慢病毒载体的构建和Neuro-2a-RHBDF2-shRNA稳转细胞系的建立. 李胜男,陈吴海,陈少凤,邓福,朱佩仪,李友. 2019

[13]马传染性贫血病毒弱毒疫苗致弱及免疫保护机制研究进展. 王雪峰,张相敏,林跃智,杜承,王晓钧. 2021

[14]利用逆转录病毒侵染技术制备转基因动物研究进展. 皮文辉,李峰. 2004

[15]绵羊进行性肺炎病原检测方法研究进展. 胡建军,符子华,易忠. 2007

[16]犬干扰素α4在CHO细胞中的稳定表达. 王晶宇,欧阳伟,王永山,夏兴霞,诸玉梅. 2017

[17]Tβ10基因过表达对离体鹿茸干细胞增殖、衰老和迁移的影响. 张伟,褚文辉,付晶,孙红梅,李春义. 2017

[18]稳定表达3种猪腹泻病毒嵌合抗原的CHO细胞系构建与鉴定. 宋旭,赵永祥,范宝超,郭容利,李基棕,刘静,李彬. 2023

[19]稳定表达PDCoV-S和RBD蛋白的293T细胞系构建与免疫原性评价. 肖丽,赵淑庆,袁雪松,范丽原,易鑫,陈琢琦,李彬,李基棕,主性. 2024

[20]慢病毒介导短发夹RNA干扰技术建立小鼠肺组织TRIF沉默模型. 谢军,龙晓茹,任洛,刘恩梅,谢晓虹. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序