茶园抗性与敏感种群茶小绿叶蝉的iTRAQ蛋白质组学分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李良德

作者： 李良德;刘丰静;李慧玲;李金玉;王定锋

作者机构：

关键词： 茶小绿叶蝉;抗性种群;敏感种群;蛋白质组学;解毒酶

期刊名称： 应用昆虫学报

ISSN： 2095-1353

年卷期： 2022 年 004 期

页码： 741-753

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】本研究旨在通过同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术，探索茶园中抗性种群（常规用药管理）与敏感种群（荒废未作管理）茶小绿叶蝉Empoasca flavescens之间的蛋白质组学差异，为后续茶小绿叶蝉的抗药性治理奠定理论基础。【方法】采用随机多点的方式采集茶小绿叶蝉，利用蛋白纯化试剂盒对总蛋白进行提取与定量。通过iTRAQ标记试剂盒对总蛋白进行酶解与标记。通过高pH-RPLC与RPLC-MS技术对多肽进行分离与鉴定。通过GO分析（Gene ontology）方法，对差异蛋白的分子功能、生物过程和细胞位置进行分析。通过KEGG Pathway网站，对差异蛋白代谢通路进行注释。通过STRING-DB数据库，对差异蛋白的互作网络进行分析。最后，对差异显著的抗性相关蛋白酶进行了分析整理。【结果】总蛋白提取结果显示，敏感与抗性种群的总蛋白含量分别为728.23μg和1 261.17μg。抗性与敏感种群之间，共有1 399个蛋白发生了明显变化。其中，上调与下调达到1.5倍以上的分别为101个和218个。GO分析结果显示，这319个差异蛋白具有离子结合蛋白、组成核糖体和氧化还原酶等功能，主要参与蛋白翻译、物质运输和小分子代谢过程，主要分布于细胞内膜、细胞质、核糖体和细胞核。KEGG分析结果显示，319个差异蛋白主要参与碳代谢、核糖体代谢和吞噬作用通路。STRING分析结果显示，319个差异蛋白通过多种路径相互调控。抗性相关蛋白酶整理结果显示，共有3个谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）、2个细胞色素P450氧化酶（P450）、2个超氧化物歧化酶（SOD）和2个过氧化物酶（POD）发生了明显变化。【结论】抗性与敏感种群茶小绿叶蝉蛋白组差异明显，差异蛋白具有多种分子功能，分布于细胞各个位置，抗性种群对药剂的解毒酶活性多数强于敏感种群。

分类号： S435.711

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