Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子中直链淀粉含量下降(英文)
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李加瑞
作者: 李加瑞;赵伟;李全梓;叶兴国;安宝燕;李祥;张宪省
作者机构:
关键词: 小麦;Waxy;RNA干涉;农杆菌介导的转化;直链淀粉
期刊名称: 遗传学报
ISSN: 0379-4172
年卷期: 2005 年 32 卷 08 期
页码: 846-854
收录情况: SCI ; 北大核心 ; CSCD
摘要: 通过RNAi策略转化小麦,以降低小麦种子中直链淀粉的含量。小麦中直链淀粉合成的关键酶是颗粒结合型淀粉合成酶(GranuleboundstarchsynthaseI,GBSSI,即WAXY蛋白),通过RTPCR方法从小麦种子中分离出Waxy基因。Southern杂交分析表明,在基因组中存在3个Waxy基因。Northern杂交分析显示出在授粉后的小麦种子中检测到WaxymRNA。利用RNA沉默策略,将Waxy编码区683bp的正向和反向片段以及150bp内含子,连接于表达载体pCAMBIA3300中玉米ubi1启动子下游。以扬麦10号授粉后15d的幼胚为外植体,利用农杆菌介导的方法进行转化。通过PCR、RTPCR和叶片离体褪绿实验鉴定出4株转基因植株。小麦胚乳I2KI染色和直链淀粉含量测定表明这4株转基因植株直链淀粉含量明显下降。研究结果表明Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子直链淀粉的含量下降。
分类号: S512.1
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