鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵玉博

作者： 赵玉博;陈普成;胡玉珍;丁蕾蕾;王波;焦晨晨;姜永萍;陈化兰;柳金雄

作者机构：

关键词： 重组鸭瘟病毒;复制非必需区;DEV拯救系统

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 008 期

页码： 795-799

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中适合外源基因插入的复制非必需区,本研究利用本实验室前期建立的DEV疫苗株多片段拯救系统,结合E/T克隆技术、LR克隆技术将含有红色荧光蛋白(RFP)表达框架的目的片段,定向插入到含DEV基因组复制非必需区的粘粒中,该位点位于DEV基因组UL区的UL44.5和UL44之间,拯救获得了重组病毒(rDEV).通过PCR和荧光显微镜鉴定该重组病毒.结果显示,经PCR扩增,r DEV可以扩增到预期目的片段,观察可见红色荧光,表明RFP基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果显示,重组病毒在CEF中的增殖效率与DEV疫苗株无显著差异.将r DEV以105 TCID50的剂量免疫SPF鸭后,DEV攻毒保护试验结果显示,r DEV和亲本株DEV活疫苗对SPF鸭的保护效率均为100%.本研究筛选到DEV基因组中的一个可供外源基因插入的位点,为以DEV为载体构建相关重组疫苗研制提供依据.

分类号： S852.65

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