奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的原核表达及其免疫原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 丁炜东

作者： 丁炜东;曹丽萍;吴婷婷

作者机构：

关键词： 奥利亚罗非鱼;促性腺激素释放激素;促性腺激素释放激素相关肽;原核表达;抗体;免疫原性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2006 年 22 卷 04 期

页码： 44-49

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasinghormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。为研究GnRH对奥利亚罗非鱼性腺发育的作用,构建了GnRHcDNA的原核表达载体并进行融合表达。利用RT-PCR方法从丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,并在大肠杆菌TB1中获得了高表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的41.6%。菌体经溶菌酶裂解,制备无细胞抽提液,Amylose-sepharose柱层析后得到分子量为56kD单一条带的目的蛋白。目的蛋白经FactorXa酶切裂解,Amylose-sepharose过柱纯化后得到纯化的GnRH前体蛋白。以80μg/只的剂量4次免疫ICR小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对GnRH前体蛋白的血清抗体应答,免疫组抗体水平显著高于空白组(P<0.05),且加强免疫第5周后抗体效价为0.707±0.320,达到高峰值,说明表达产物具有免疫原性,可以刺激机体产生免疫应答。

分类号： S917.4

  • 相关文献

[1]奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素前体蛋白的克隆与表达. 丁炜东,曹丽萍,吴婷婷. 2005

[2]奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素及相关肽基因的克隆与表达. 丁炜东,曹丽萍,李建林,吴婷婷. 2006

[3]奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的克隆及原核表达. 曹丽萍,丁炜东. 2006

[4]罗非鱼无乳链球菌Sip基因的克隆、表达及免疫原性分析. 黎炯,叶星,可小丽,卢迈新,迟妍妍,田园园. 2012

[5]猪细小病毒PPT1株免疫原性研究. 张莉,王利丽,鄢明华,韩伟. 2010

[6]罗非鱼AMH基因的原核表达及多克隆抗体制备. 丁炜东,曹哲明,曹丽萍. 2010

[7]温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备. 武改霞,李婷婷,孙现超,青玲. 2012

[8]家蚕类胰岛素相关肽结合蛋白2(BmIBP2)的原核表达与组织特异性分析. 高坤,邓祥元,朱峰,汪生鹏,钱荷英,郭锡杰. 2012

[9]普通烟草铁氧还蛋白Ⅰ的原核表达、抗体制备及在ToMV侵染烟草体内表达分析. 孙现超,李勇,周常勇,青玲. 2010

[10]犬和猫狂犬病病毒抗体SPA-ELISA检测方法的建立. 范晓娟,曾妮,李刚. 2010

[11]水稻光敏色素B抗体的制备及特异性检测. 闫丽华,卢楠楠,和亚男,尹海波,谢先芝. 2017

[12]坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的截短表达及其抗体间接ELISA方法的建立与应用. 唐晟,马瑶,冯贺龙,李丽,汪宏才,张蓉蓉,曾哲,姚伦,温国元,邵华斌,罗青平,曾驰,谢佳燕,商雨. 2024

[13]长角血蜱Septin-3的原核表达及其免疫分析. 车丽妍,王彦龙,张振杰,刘光远,关贵全,殷宏,任巧云,赵爱云,王国辉,张文霞,罗金,齐萌. 2024

[14]大肠杆菌外排泵系统基因表达及ELISA检测方法建立. 吕殿红,蒋红霞,曾振灵,陈杖榴. 2008

[15]大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达. 余波,王芳,康超,李永霞,周思旋. 2017

[16]罗非鱼无乳链球菌C5a肽酶(ScpB)的原核表达及其免疫原性. 李庆勇,可小丽,卢迈新,朱华平,高风英,刘志刚. 2014

[17]丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的克隆表达和免疫原性分析. 张靖鹏,江锦秀,林裕胜,游伟,胡奇林. 2019

[18]1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性. 齐冬梅,袁建丰,覃宗华,吴彩燕,谢明权. 2011

[19]弓形虫胚层发育相关蛋白的原核表达及免疫原性研究. 田维鹏,张念章,高琦,鲁力,朱兴全,宋铭忻. 2014

[20]美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7的原核表达及免疫原性分析. 欧云文,马炳,马小元,王俊,丁耀忠,张永光,张杰. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序