水貂白细胞介素-4基因的克隆、序列分析与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 范思宁

作者： 范思宁;张海玲;赵建军;王洋;胡博;吕爽;马凡舒;李欣彤;凌明玉;赵辉;廉士珍;闫喜军

作者机构：

关键词： 水貂;白介素-4;序列分析;原核表达

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2017 年 44 卷 01 期

页码： 30-37

收录情况： 北大核心

摘要： 为了获得高纯度的白细胞介素-4(IL-4)蛋白,对分离得到的水貂外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导后,提取淋巴细胞总RNA,根据GenBank中登录的雪貂IL-4基因序列,设计并合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得了水貂IL-4基因序列全长399bp,编码132个氨基酸,与雪貂氨基酸序列同源性高达99.2%,与熊猫、犬同源性均为90.0%。将编码成熟蛋白基因构建到原核表达载体pProEX-HTb,IPTG诱导后,SDS-PAGE及Western blotting结果显示,IL-4表达产物为15ku的包涵体蛋白。通过His-Trap HP亲和层析预装柱变性、复性洗脱可获得高纯度的重组IL-4蛋白。本试验为水貂IL-4基因的进一步研究奠定了基础。

分类号： S865.22`Q78

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