马立克病病毒meq基因缺失毒株HN302Δmeq的构建及致病性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张志会
作者: 张志会;滕蔓;刘金玲;郑鹿平;王伟东;张文凯;张多;李林燕;张卓;柴书军;樊剑鸣;罗俊
作者机构:
关键词: 鸡;马立克病病毒;meq基因;CRISPR/Cas9;基因编辑;致病性
期刊名称: 畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2024 年 56 卷 010 期
页码: 71-79
收录情况: 北大核心
摘要: 马立克病(MD)是由马立克病病毒(MDV)感染引起的一种重要的家禽免疫抑制病与肿瘤病,严重危害世界养禽业。随着MDV持续进化及毒力增强,急需研发新型高效的MD疫苗以加强该病的有效防控。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以MDV变异株HN302为亲本毒株,成功构建了meq基因缺失的毒株HN302Δmeq,经过PCR扩增鉴定及测序分析,证实meq基因缺失且传代稳定。间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析均证实HN302Δmeq感染鸡胚成纤维细胞(CEF)中无meq基因表达,并且meq基因的缺失不影响其他病毒基因的表达。利用RT-qPCR分析HN302Δmeq在CEF中的体外增殖曲线,结果显示meq基因的缺失不影响MDV体外复制。1日龄SPF鸡攻毒试验结果显示,与亲本毒株HN302相比,HN302Δmeq对宿主无致病性,其诱导的MD发病率、死亡率和肿瘤发生率均为0,且未观察到明显的免疫器官萎缩。上述数据表明,HN302Δmeq的毒力明显丧失,具备继续作为疫苗候选株开展相关研究的可能性。本研究成功构建了MDV变异株HN302的meq基因缺失毒株,为后续MDV的致病机制及新型疫苗研究奠定了基础。
分类号: S852.65
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