猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒抗原含量实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李雪峰

作者： 李雪峰;康斌;赵炳武;武玉梅;戴伶俐;董鹏;张建春;张春阳;斯琴高娃

作者机构：

关键词： 实时荧光定量PCR;猪圆环病毒2型;灭活疫苗;Cap基因

期刊名称： 畜牧与饲料科学

ISSN： 1672-5190

年卷期： 2021 年 42 卷 001 期

页码： 8-13

摘要： 依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭活时间对检测结果的影响.结果显示:该方法只对猪圆环病毒2型基因有特异性扩增,其他3种对照病毒基因的扩增结果均为阴性;检测灵敏度达到102.0 TCID50/mL,比普通PCR方法高100倍;方法的重复性好,对同一样品进行10次检测,变异系数为2.28%;不同灭活剂用量和灭活时间对结果的影响较小,不会因各厂家使用的灭活剂用量和灭活时间不同,影响疫苗对比实验的公平性.该研究成功建立了一种评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,用于猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中病毒抗原含量的定量,其结果可以反映不同猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中抗原含量差异,为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗病毒抗原含量评估方法提供了新的思路.

分类号： S852.4%S852.659.2

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