绵羊肺炎支原体延伸因子EF-P基因的克隆、表达及其重组蛋白免疫原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田路路

作者： 田路路;孟庆玲;乔军;于伟伟;孟丹;李重阳;才学鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： 绵羊肺炎支原体;EF-P;克隆;表达;免疫原性

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 1577-1583

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选绵羊肺炎支原体(MO)免疫相关蛋白,以MO新疆流行株基因组DNA为模板,通过PCR扩增其EF-P基因,测序后对其编码蛋白进行分子特征分析;用生物信息学软件预测其抗原表位集中区编码片段;进一步将该基因片段克隆入pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a(+)-EF-P,将pET-32a(+)-EF-P质粒转化至感受态细胞Escherichia coli BL21(DE3)中,IPTG诱导目的蛋白表达后,检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDS-PAGE结果显示,EF-P重组蛋白分子质量为29.5ku;Western blot结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,证实其具有良好的反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该重组蛋白可诱导机体产生特异性抗体,采用正向间接血凝方法检测效价可达1∶64,提示其具有较强的免疫原性。

分类号： S852.62

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