湖南柑桔病毒病的研究现状与策略
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吴德喜
作者: 吴德喜;舒广平;宋顺华;刘建雄
作者机构:
期刊名称: 湖南农业科学
ISSN: 1006-060X
年卷期: 1989 年 01 期
页码: 41-44
摘要: 一、国内外动态 自从1933年Fawcett通过嫁接试验首次证明柑桔鳞皮病(Psorosis)是一种病毒病以来,已经有多种方法用来鉴定柑桔病毒类病害,如生物测定、凝胶电泳、ELISA、单克隆抗体及分十杂交等。其中尽管生物鉴定法的时间周期较长,但仍是目前被广泛采用而有效的方法。近年台湾统计报道了全世界已鉴定出约30几种柑桔病毒类病害,其中最重要的是鳞皮病、衰退病(Tristeza)、裂皮病(Exocortis)、青果病(Greening)及碎叶病(Tatter leaf)等。柑桔病毒病在世界柑桔产区普遍存在,常在长期无性繁殖的老系品种中发生,主要引起柑桔叶片黄化、斑驳、矮化、裂皮、枯枝、僵果、树势衰弱以致死树,严重威胁柑桔生产。例如,三十年代巴西因衰退病危害损失上千万株柑桔帐 五十年代南美洲由于衰退病危害损失600多万株柑桔树;阿根庭因鳞皮病危害柑桔树每年损失5—8%;裂皮病可使感病品种减产30—70%。 目前,美国、巴西、日本、澳大利亚及西班牙等柑桔生产国主要是实施柑桔品种改良计划,通过鉴定选择无病毒母本树,或热处理及微芽嫁接脱毒方法,建立无病毒母本园;开展筛选利用抗或耐病砧木;以及利用弱毒系的交叉保护作用和加强对虫传病毒病媒介的防治,用以防止或减轻柑桔病毒病的发生与危害。 我国柑桔病毒病的研究始于五十年代。林孔湘教授针对广东、广西和福建的柑桔黄龙病进行了流行病学及防治学的研究,其成果已为国内外学者采纳与应用。而病原学的研究,1979年柯冲根据电镜观察,认为其病原为类立克次体;1986年第十届国际柑桔病毒学会议文献报道,用柑桔木虱接种将黄龙病病原传染柑桔,其发病后在筛管细胞内观察到类细菌生物。1981年,中国柑桔所、广东果树所及湖南园艺所等单位,先后两次对我省郴州及零陵等地的黄龙病进行了调查,结果在郴州市、宜章及临武县发现少量木虱,并在宜章观察到4株黄龙病树。1983年,湖南省植保站和湖南农学院等单位先后通过普查及生物鉴定,进一步确诊了郴州宜章县的黄龙病及传病媒介昆虫木虱的发生种类等,提出并采取了防治此病的措施。 1965年,陈延熙等用墨西哥来檬和麻疯柑作指示植物,首次证明两广和四川、湖南等地外观正常的柑桔树体内普遍存在柑桔衰退病毒。1976年及1979年,赵学源等研究报道衰退病常与黄龙病复合感染。1980年,舒广平等鉴定的16个柑桔品种37个品系或株系全部带有衰退病毒,部分还与裂皮病复合感染。但迄今未见衰退病在国内造成严重危害的报道。 七十年代中期以来,国内相继开展了裂皮病的调查鉴定及脱毒的研究。1983年赵学源等报道,在已鉴定的柑桔品种中,从美国和摩洛哥等国引进的品种有81.4%带裂皮病类病毒,国内品种已有20.4%感染此病。随后湖南、浙江和广西等省亦报道了裂皮病的发生及危害情况。并且,通过微芽嫁接和指示植物鉴定,中国柑桔所和湖南园艺所等已培彦出一批脱除丁裂皮类病毒的良种脱毒苗。 42 1987年,浙江台州农校、中国柑桔所及湖南园艺所先后报道了国内的北京柠檬、蕉柑、杨柑、暗柳橙、稷桔及冰糖橙等品种带有碎叶病毒。 二、目阶柑枯生产中存在与清@伤危客有失的羹来问题 1.黄龙病:根据黄龙病媒介木虱的生物学特性及对生态学的要求,目前尚无有‘关木虱能在湘南郴州、零陵等地终年定居建立种群的研究报道,因而在十几个县内发现的木虱可能是由两广及福建的黄龙病区迁飞入境,亦可能有农民或单位从该病区引进病苗。所以,黄龙病在我省的实际分布可能不只限于6个县内,潜伏感染和隐症为害的可能性是相当大的。 2.温州蜜柑的青枯病:一般桔树进人结果期后即见发病,染病后首先树冠顶部叶片突然呈失水状,向内纵卷,扩展至全株时所有叶片凋萎干死,而叶色不退,最后整株树死亡。1976年,我们先后两次调查黔阳、宜章等县,共发现500多株病树,其中黔阳县原东方红园艺场青枯病株率达24.31%。同时,在调查的青枯病树中,以黄皮酸橙作砧木的病株率占93.6%,而积砧的病株率只有B.4%。对病树重剪,可基本恢复树势,但不久又复发青枯死树,病理解剖发现病树导管内有黄褐色侵填物。此类青枯病目前仍在部分县市零星发生,病因至今不明。 S.积砧甜橙黄化死树现象:1975年在黔阳县调查,发现此类病状一般在苗期发生少,约在定植后第3年开始发生,第4—5年发生严重。发病后主要是叶片黄化,部分植株矮化,根部腐烂变黑,接穗与砧木接口处脆而易折断,且断面光滑。这种黄叶死树的病状目前只见发生在积砧橙类的砧穗组合中,而用酸橙及朱续桔作砧木的甜橙则尚未见有此现象。当时认为这是由于冰糖橙与积砧不亲和所引起的。至今此种现象在我省部分县市内仍有发生。1986年戴胜根等报道,1970年从湖南引进的冰糖橙定植开花后出现大量黄化死亡现象;1973年在湖南东安县用小叶小花积嫁接暗柳橙皿号与新会橙新生系,结果两品种两年内黄化率亦达100%与33.3%。由此推测积砧甜橙发生黄化似乎与病毒无关,很可能是不亲和所致,进而提出了嫁接口黄环的有无可以作为甜橙与积砧亲和性的指标。 4.温州蜜柑黄化落叶现象:其叶片黄化可发生在一个侧枝或主枝上,也可是全株性黄化,落叶多在采果前后发生,常从当年秋梢开始,部分或全部叶片脱落。病树须根较细,新根少,树势衰弱,开花多,座果少且果小。1985年在衡阳跃进农场调查,发现局部黄化落叶病村约占21%,零星分布的约占2%。长沙市东方红园艺场也有约2%温州蜜柑树黄化落叶,桂阳等地亦发生类似现象。造成温州蜜柑黄化落叶的原因目前尚不清楚。 三、柑楷病枣类清害诊陨研究.的现状 我所柑桔病毒类病害的研究始于1982年,日前已具备从事该项研究的必要配套设备有;80n。‘病理实验室、40m’组培室、封闭式控温温室、塑料大棚以及鉴定所需的指示植物,基本上能满足当前开展应用性病毒病研究的需要。 卫.裂皮病:是由一环状*NA类病毒引起的,主要为害以积和积橙作砧木的柑桔树,典型病状为砧木部分树皮纵裂和翘起,或不明显裂皮,最后呈鳞皮状剥落,在砧穗接合处有一道明显而整齐的分界线,树势衰退,矮化或不明显矮化。据对我省长沙、零陵、怀化等地11个科研与生产单位共166个积砧柑桔品种的田间调查看,已有37个品种感染此病,占调查品种总数的23.5%,其中以橙类最为敏感,发病严重,其余依次为桔类、柑类、拘椽类。经指示植物鉴定的17个外来品种感病率达100%。所鉴定柑桔中的七大类或属的带毒情况表明,除帜属、金柑属、抽类尚未检测到带毒品种或品系外,橙类中73.l%、核类中11.5%、柑类中11.5%及构椽类中3.8%的品种或品系已带裂皮类病毒。全省41个优良品种初选母本树中,仅鉴定出兴津7号和邵阳尾张1号带毒,其余的尚未观察到带毒病状。 2.衰退病:利用指示植物墨西哥来檬鉴定了邵阳、零陵和长沙3个地区的冰糖橙、大红甜橙、尾张与宫川及栖柑等37个品种品系或株系(包括部分初选母本树),结果全部带有衰退病毒,说明柑桔衰退病已在我省普遍发生,同时无论是引进的或国内的品种均巳带毒。然而,田间调查表明,优良品种初选母本树单株及其他枯树井未困带衰退病毒而显现出明显的危害病状。应用*二S人技术检测16个柑桔品种或品系一 其中互0个呈现阳性反应,占68.8%,说明只有部分品种带农迟病每,mi另一部分呈现阴性反应的品种似乎不带此病毒,这一趋势与利用指示植物鉴定田间桔树带毒结果存在明显差异。 3.碎叶病;主要为害以帜和积橙作砧木的柑桔树,其典型病状为叶片黄化,树体矮化,嫁接部皱榴,出现负砧现象,嫁接口处易断裂。针对我省部分县市积砧冰糖橙、改良橙等品种黄化死树的现象,我们利用特洛亚积橙和鲁斯克帜橙作指示植物,对黔阳、麻阳、新宁及长沙的部分柑桔品种进行了碎叶病鉴定,结果麻阳的积砧黄化冰糖橙1株成年树及2株苗于、黔阳县园艺场的2株黄化落叶枯枝、l株黄化矮化和1株外观较正常的积砧冰糖橙,以及安江农校1株外观较正常的檀桔已检测出带碎叶病毒,在指示植物上出现黄斑、扭曲、畸形、破损等典型病状。这种病树的病状及鉴定结果与国外的报道几乎完全一致。 4.其他病毒病:从1983年开始,我们还利用指示植物鉴定了某些县市的部分初选母本树品种是否带鳞皮病、木瘤病、木质陷点病、顽固病、青果病等,但至今尚未观察到任何带毒的病状。 四、微芽妹芯在腴除椎格演@申的应用 在许多病毒一寄主的组合中,距生长点大约100—1000微米的部位,井不含或只含少量病毒,因而切下茎尖微芽进行组织培养或嫁接,可似获得无病毒营养系。柑桔通过微芽嫁接,可以从感染了病毒类病害的老系优良品种上获得无毒母本苗。我所已从 1983年开始进行微芽嫁接脱除裂皮病类病毒的应用研究,用微芽嫁接了华脐、鲁脐、Bonanza脐橙、福本脐橙、哈姆林甜橙、卡特尼拉甜橙等20多个优良品种,试管内嫁接成活率约60%,但移栽成苗率不高,脱毒率不稳定。对移栽成活苗再次利用指示植物进行脱毒效果鉴定,经2年以上观察,目前已有华脐、克脐、汤脐、鲁脐、卡特尼拉甜橙等8个品种获得无裂皮类病毒苗木,井对经鉴定证实确实未脱毒干净的试管移栽苗及时进行烧毁处理,对确诊脱毒干净的移栽苗,有计划地用于建立原种母本园或原种采穗圃。 五、下一阶段的研究策略及愿没 l.病毒病种类的鉴定;1986年4月,美国植物病毒学家C.N.Roistacller博士考察了浙江省柑桔生产及病毒病发生情况,他在枯园观察到了衰退病、碎叶病、木质陷孔病、裂皮病和温州蜜柑矮化病的田间病状,并认为未观察到的鳞皮病等病毒病舍也可能存 43在。这种预见是有一定依据的。象湖南柑核栽培历史悠久,品种资源申富。引进品种繁多,病毒病的种类可能不限于目前已鉴定出来的几种。 指示植物鉴定证实湘南已发生柑桔黄龙病,同时在13个县市调查发现具有传播此病的媒介昆虫一木虱,因此不能忽视黄龙病将对湘南柑桔生产构成的潜在威胁,对其研究应侧重于流行病学角度,定期监测其蔓延和为害的趋势,以防患于未然。 大量的调查鉴定证实裂皮病在我省分6i广泛,为害严重,下一阶段对裂皮病的研究应着重进行弱毒系的筛选与应用的探索。在埋论上,弱性毒株是存在的,但其弱毒系在指示植物上的弱性反应不一定与其在田间柑桔上的弱毒性反应相关联,同对利用失化手段检测裂皮类病毒RNA时。亦发现几种相似的RNA同时存在,并且不一定所有检测出的不同RNA均具有导致裂皮病的致病性,或者也不能明确其弱毒系,似乎也不褪排除与裂皮类病毒RNA的分子量相似RNA是W桔组织细胞的组分。因此,要筛选出具有应用价慎的裂皮病粪疯毒的乾满系并非易事。而采用一系列指示植物鉴定、生化检测以及同干扰试验筛选相结合的系列配套筛选手段,是有可能探测到可被利用的弱毒系的。 柑桔衰退病已在朔南普遍发生,可能是由于积砧的耐病性而在田间尚未表现出明显的危咨。但据资料报道,衰退病的强毒系可以引起柑桔树凋萎死亡,而这种相似的病状在我省已有调查报道。所以,探明我省袒合存在衰退病毒强毒系是一个值得班究的的题。 过来认为,砧穗不杀消I导致极砧甜搂黄化死树现象。现有的资料及我们的鉴定结卅,尚M二叨咖良。V能括怖叶病廓引进的,刀。且外观生长与结果止四显病态反应的树也可能带此病颔。所以,柑桔碎叶病的研究,除J”继续深人谰查鉴定碎叶病在湖雨省的分布与为害之外,应着重研究并证实它是否是导致祝砧冰糖橙黄化死树的根本原出,以为防治减轻此病的危害提供科学依据。 其他柑桔病毒病在我省也有存在的可能性,2种或2种以上的病毒混合感染问题等,。都是值得探索与册究的内稀。 。;2。防治途径的研究:拄制和减澎柑枯病毒病为害的方法,已经响厂很多的研究报道,今后除利用捞规的揩施之9卜 长远的策 44略应当是防重于治,综合治理。近几年,针对我省柑桔裂皮病的发生危害惰况,应用研究将从以下三个方面进行: (1)抗性砧木(包括中间砧木)的筛j&与利用。不同种类的砧木对病毒类病害的感病性可能存在差异,特别是有的病毒病只为留某些砧木,因而利用抗性砧木减轻病毒类病害的危害,是完全有可能的。利用我所现有可作砧木的ZO余种材料,还可以从外地引进一些有价值的品种品系,首先在温室内进行抗佚筛选试验,经过儿年的研究,将有。4能为生产逐步提供有应用价值的抗性砧水。 (2)弱毒系的筛选与利用。探测柑牺病毒的弱毒系是病毒研究的任务之一,在学术上尽管病毒学家对弱毒系利用前景持有不同的看法,但采用接种弱毒系来干扰抑制强澎系的危害已经有了成功的报道。弱毒系的接种,除了可能对强毒系产生抑制而表现交叉保护作用外,还可能使某些砧穗组合的柑桔植株矮化,以利于开展柑桔矮化密植丰产栽培,具有双重的经济效益。筛选弱毒系的试验,首先可采用多种方法在室内或温室内进行,或从外省引进弱毒系直接在温室内进行干扰保护试验。把筛选出来的弱毒系接种在无毒的苗木上,定植在病区,或者对目前无病状表现的树预先进行弱毒系接种,这样可以达到避兔或减轻强毒系造成严重危沓的目的。 (3)微芽嫁接等脱毒技术的综合应用研灾。世界各先进柑桔生产国为防治病毒类病害,根本的策略都是实施柑桔品种的改良计划,主要是采用鉴定选择无病毒母本树或通过热处理及微芽嫁接脱毒技术培胄无裂皮病类病毒、碎叶病毒母本兢,繁育推广无毒苗木。我们在现有研究的基础上,允分利用现a的配痪设备,小断改进微芽嫁按及其育苗妓术,响讣划地迸行优良品种太病毒母本伯的标准化培育与生产,即鉴定、脱毒-.浆定一湿室栽培繁育一级无毒原种母本苗一纱笼或大棚栽培繁育二级采穗母本茁叶在隔离区建立生产良种母本园一大田生尸‘无病毒良种茁木,性之脱毒技术的应用、无毒快速容器育茵、;无毒母本园的建立以及无毒苗木的推广科学化、程序化、规范化。从1989年开始。我所将会不断为重点生产单位趁立母本倒捉供部分优良品种肘 胺穗或卅本协, 减轻或防止一些主要柑桔病毒鞠为害的根本途径。湖南柑桔病毒病的研究现状与策略@吴德喜$湖南省农科院园艺所 @舒广平$湖南省农科院园艺所 @宋顺华$湖南省农科院园艺所 @刘建雄$湖南省农科院园艺所
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