马白细胞介素-18单克隆抗体的制备及其特性的初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 童铁钢

作者： 童铁钢;白宇;徐树兰;刘光亮;肖一红;王群;张维军;吴东来

作者机构：

关键词： 白细胞介素-18;马白细胞介素-18成熟蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2007 年 15 卷 05 期

页码： 38-42

收录情况： CSCD

摘要： 利用纯化的用原核系统表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白(pET-mEIL-18)抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以昆虫杆状病毒表达系统获得的马白细胞介素-18成熟蛋白(mEIL-18)作为抗原进行间接ELISA检测,筛选并最终得到了9株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株。利用IFA试验对9株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的9株细胞分泌的抗体都是针对mEIL-18的特异性抗体。将此9株单克隆抗体分别与用原核系统分段表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白pET-mEIL-18-(1)(mEIL-181～78位氨基酸残基)和pET-mEIL-18-(2)(mEIL-1879～157位氨基酸残基)蛋白进行特异性ELISA检测,结果表明,9株单克隆抗体有5株识别表达的pET-mEIL-18-(1)(mEIL-181～78位氨基酸残基),而另外4株单克隆抗体与pET-mEIL-18-(2)(mEIL-1879～157位氨基酸残基)发生反应,说明所获得的9株单克隆抗体至少针对pET-mEIL-182个或2个以上不同的抗原表位。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示,除M1F11、M3A11和N7D9为IgM,其余的单克隆抗体均为IgG1,而且所有单克隆抗体的轻链均为!链。

分类号： S852.43

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