山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建及表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 谢芳

作者: 谢芳;张强;颜新敏;吴国华;李健;朱海霞;郭爱疆;韩若婵;施程洪;鞠厚斌;朱彩珠;岳城;才学鹏

作者机构:

关键词: 山羊痘病毒;P32基因;毕赤酵母;诱导表达

期刊名称: 新疆农业大学学报

ISSN: 1007-8614

年卷期: 2008 年 29 卷 03 期

页码: 1-4

收录情况: 北大核心

摘要: 从重组克隆载体pMD18-P32中扩增出山羊痘病毒P32基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-P32。重组质粒pPIC9K-P32用SalⅠ线性化后,与毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115混合后电转化,使重组表达载体与酵母染色体发生同源重组。采用G418抗性梯度筛选法得到高拷贝重组菌株,甲醇诱导目的基因表达。SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,用酵母成功表达出了31 kD的重组蛋白,该蛋白具有生物学活性,能被山羊痘阳性血清识别。

分类号: S852.65

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