鲤浮肿病毒P4a蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 方珍珍

作者： 方珍珍;杨圆圆;于宏;孙学亮;石洪玥;陈成勋;季延滨;李莹莹

作者机构：

关键词： 鲤浮肿病毒(CEV);P4a蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2025 年 33 卷 011 期

页码： 2547-2556

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鲤浮肿病毒(Carp edema virus, CEV)是近年来流行的一种DNA病毒，严重危害着锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)和鲤(Cyprinus carpio)养殖的健康发展。本研究以鲤浮肿病毒的P4a基因组序列设计特异性引物，克隆P4a基因序列全长，再通过原核表达系统构建重组表达质粒p ET-32a-P4a，经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达后获得P4a重组蛋白，经SDSPAGE鉴定、纯化、复性后所得His标签融合蛋白免疫新西兰大白兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体，并对该抗体进行二喹啉甲酸(bicinchoninic acid assay, BCA)法浓度检测和Western blot鉴定。结果表明，本研究成功构建pET-32a-P4a原核表达载体，经NCBI Blast比对分析，载体序列与P4a蛋白理论序列同源性为99%;BCA法检测该抗体浓度为2.05 mg/mL;SDS-PAGE和Western blot鉴定显示，该抗体免疫原性良好。综上，本研究成功制备CEV P4a蛋白多克隆抗体，为CEV的免疫学检测、疫苗研发等提供了数据支持。

分类号： S943

  • 相关文献

[1]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015

[2]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[3]延边白鹅IFN-α基因的原核表达及其表达产物生物学活性的研究. 彭永刚,陈海迪,高旭,张颖,鲁承. 2014

[4]绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备. 马毅,舒建洪,李晴,关宏,安晓荣,陈永福. 2009

[5]新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 毕庄莉,朱英奇,陈宗艳,李传峰,孟春春,王桂军,刘光清. 2014

[6]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

[7]小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备. 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志. 2009

[8]鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备. 陈明,徐幸莲,周光宏,汤晓艳,袁飞,陈爱亮. 2013

[9]桑树几丁质酶基因Machi1的克隆及原核表达. 肖圣燕,朱峰,冉瑞法,李镇刚,张永红,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019

[10]西藏株小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 于瑞嵩,高位相,李凤平,董世娟,李震. 2018

[11]利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体. 徐志伟,赵杰,刘伟忠,刘照亭,王期. 2016

[12]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. 张艳,王文秀,刘海隆,曹宗喜,谭树义. 2019

[13]一个植物半胱氨酸蛋白酶多克隆抗体的制备及其应用. 彭琪琪,羊健,廖乾生,张恒木. 2018

[14]灰飞虱内生病毒HiPV外壳蛋白VP1多克隆抗体的制备及在病毒检测中的应用. 朴君,许春玲,朴敬爱,周益军,李硕. 2019

[15]猪源Viperin基因的克隆、原核表达以及抗体的制备. 方剑玉,朱文豪,李海利,郭小参,白献晓,王克领. 2018

[16]琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析. 李琼艳,陈安利,荀利杰,刘增虎,廖鹏飞,杨伟克,董占鹏. 2021

[17]口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备. 辛旭,吴香菊,齐静,王永志,李相安,杜正国,单虎,杜以军. 2021

[18]山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析. 江锦秀,张靖鹏,林裕胜,游伟,胡奇林. 2021

[19]鸭寡腺苷酸合成酶样蛋白原核表达及多克隆抗体制备. 毕可然,李银,韩凯凯,赵冬敏,刘青涛,刘宇卓,黄欣梅,杨婧. 2019

[20]二点委夜蛾非典型嗅觉受体AlepOrco的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备. 田彩红,刘晓光,黄建荣,王瑛,封洪强. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序