绵羊细粒棘球蚴Ag B基因的克隆、表达及其重组蛋白纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘田莉

作者： 刘田莉;易继海;营瑞文;宋雪梅;乔军;孟庆玲;胡政香;才学鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： 细粒棘球蚴;Ag B基因;原核表达;绵羊

期刊名称： 石河子大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-7383

年卷期： 2014 年 32 卷 06 期

页码： 687-691

摘要： 为克隆、表达绵羊细粒棘球蚴Eg Ag B基因,并纯化重组蛋白,采用PCR方法从绵羊肝脏包囊病料中扩增Ag B基因,克隆入p MD18-T载体中,测序后进行序列分析。将Ag B基因亚克隆入原核表达质粒p ET-28a中,转化入E.coli BL21感受态细胞中,用IPTG诱导Ag B蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示:克隆的Ag B基因全长333 bp,通过SDS-PAGE可以检测到分子量为20 ku的特异性重组蛋白,与预期值相符;Western blot分析结果显示,该蛋白可与Eg阳性血清发生免疫学反应。本研究在大肠杆菌中成功表达的绵羊细粒棘球蚴Ag B蛋白,并证实其具有良好的反应原性,为绵羊细粒棘球蚴感染检测试剂的研发奠定了基础。

分类号： S852.73

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