木薯MeLOB36基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 阳慧

作者： 阳慧;张彤;王亚杰;陆小花;刘姣;李瑞梅;郭建春;耿梦婷;姚远

作者机构：

关键词： 木薯;转录因子;MeLOB36基因;基因编辑

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2023 年 011 期

页码： 3612-3618

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： LBD基因家族是指含有侧生器官边界（lateral organ boundaries, LOB）结构域的一种植物特异性转录因子家族，在植物的生长发育和代谢调控等方面起着至关重要的作用。木薯MeLOB36基因是LBD基因家族成员，前期研究发现该基因在木薯根尖、体细胞胚、脆性胚性愈伤组织表达量较高，推测其参与了木薯植株的形态建成。为了鉴定MeLOB36基因的功能，本研究利用在线软件CRISPR-P v2.0在保守区域设计靶标MeLOB36基因的sg RNA，构建MeLOB36基因的编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeLOB36-sg RNA。将重组载体转化LBA4404根癌农杆菌后侵染木薯脆性胚性愈伤组织，通过PCR扩增MeLOB36基因编辑靶点及潜在脱靶位点区段序列，进行Sanger测序。结果表明，MeLOB36基因被成功编辑，且未脱靶。本研究有助于进一步获得MeLOB36基因的突变体，从而鉴定MeLOB36转录因子对木薯植株形态建成的影响。

分类号： S533

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