鸭黄病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高凤

作者： 高凤;于可响;马秀丽;李玉峰;王友令;李建亮;崔言顺

作者机构：

关键词： 鸭黄病毒;实时荧光定量RT-PCR;TaqMan探针

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2013 年 33 卷 01 期

页码： 16-19

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸭黄病毒E蛋白基因序列设计了1对特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量RT-PCR检测鸭黄病毒的方法。根据含鸭黄病毒目的扩增片段的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线(Y=-3.39 X+43.18,r=0.973)。该方法具有特异性,对鸭病毒性肝炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒、鸭瘟病毒、猪乙脑病毒的核酸都没有扩增反应。敏感性试验显示,建立的此方法最低可检出1.9个TCID50病毒核酸。该方法对5只健康雏鸭人工感染86h后的组织器官样品(盲肠扁桃体除外)的检测结果均为阳性,与病毒分离鉴定的阳性符合率为100%。结果表明,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过3h,为鸭黄病毒病提供了一种敏感特异的定量检测方法。

分类号： S858.32

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