双向转录/表达载体的构建及其在马流感病毒反向遗传系统中的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张翔

作者： 张翔;郭巍;王晓钧

作者机构：

关键词： 双向转录/表达载体;EF1-α启动子;反向遗传学;病毒拯救;马流感病毒

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2016 年 38 卷 11 期

页码： 860-864

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建用于拯救流感病毒的双向转录/表达载体,本研究以p EF4/myc-His B为骨架首次构建了含有人源的EF1-α和pol I双启动子的载体p EZ,并通过报告基因证明其具有双向转录/表达的功能。此外,基于p EZ载体分别构建含有马流感病毒(EIV)A/equine/Jilin/1/1989(H3N8)(JL89)株各个节段c DNA的8个重组质粒,且其中HA节段通过点突变技术引入分子遗传标记(HindⅢ和NdeⅠ酶切位点)。将8个重组质粒共转染293T细胞,拯救出病毒(r JL89)。病毒滴度测定显示,拯救的第一代病毒具有较高的病毒滴度(2.38×105 TCID50/m L);序列分析表明,r JL89与JL89的各个节段的序列几乎一致性(99.9%~100%);酶切鉴定表明,r JL89稳定携带分子遗传标记(HindⅢ和NdeⅠ酶切位点);血凝效价测定表明,r JL89与JL89有相同的血凝效价(28);生长动力学研究显示,r JL89具有与JL89相同的生物学特性。以上结果证明,基于p EZ载体建立了EIV JL89株的8质粒反向遗传系统,该系统可以拯救出较高滴度的病毒。本研究将为进一步开展EIV分子生物学研究提供有效平台。

分类号： S852.652

  • 相关文献

[1]H3N8亚型马流感病毒拯救体系的建立. 杜金玲,刘明,刘春国,李洪涛,张新涛,石薇琳. 2009

[2]马流感病毒A/Equine/Huabei/01/07(H3N8)对灵缇犬的实验性感染. 蒋桃珍,刘月焕,林健,韩春华,潘洁. 2010

[3]马流感病毒（A／Equine／Qinghai／1／94）神经氨酸酶基因的克隆与同源性分析. 杨建德,王文军,薛飞,王晓钧,朱远茂,赵立平,吕晓玲,沈荣显,许景军,相文华. 2003

[4]马流感病毒H3亚型血凝抑制试验抗原的研究. 吴涛,林健,毛娅卿,韩春华,王嘉,潘洁,王哲,孔冬妮,蒋桃珍. 2013

[5]马流感A/马/京防/74-1(H7N7)毒株HA基因的序列分析. 王秀荣,杨建德,许景君,李冬梅,赵立平,邓国华,相文华. 2004

[6]马流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 姬媛媛,郭巍,王晓钧,王征,卢刚,赵立平,李红梅,相文华. 2011

[7]马流感病毒A／马／青海1／94株亚型鉴定及其HA基因序列特征. 王晓钧,贾斌,杨建德,田国斌,薛飞,唐秀英,相文华,沈荣显. 2003

[8]马流感病毒(A/Equine/Qinghai/1/94)神经氨酸酶基因的克隆与同源性分析. 杨建德,王文军,薛飞,王晓钧,朱远茂,赵立平,吕晓玲,沈荣显,许景军,相文华. 2003

[9]马流感病毒NP单克隆抗体的制备及特性鉴定. 姬媛媛,郭巍,王征,赵立平,李红梅. 2011

[10]H3N8亚型马流感病毒样颗粒的免疫防治效果评价. 于海英,孙艺学,秦佳仪,王玮,张鹏举,丛彦龙. 2022

[11]马流感病毒NP基因的原核表达及其抗原性分析. 姬媛媛,郭巍,相文华. 2010

[12]马流感病毒血凝素基因甲病毒复制子重组表达质粒的构建及其免疫效力评价. 仇铮,郭巍,孙元,戚亭,仇华吉,相文华. 2012

[13]家畜传染病学分会第十三次学术研讨会学术报告之五中国马流感研究现状. 相文华. 2009

[14]黑龙江地区一株马流感病毒的分离与鉴定. 郭巍,卢刚,戚亭,王晓钧,相文华. 2012

[15]从驴体内分离一株马流感病毒及其HA基因的遗传特征分析. 戚亭,郭巍,戴伶俐,李雪峰,何娜,盛明巍,赵立平,李红梅,相文华. 2010

[16]中国马流感研究现状. 相文华. 2009

[17]马流感病毒(H3N8亚型,Huabei株)对马的致病性研究. 吴涛,王嘉,林健,毛娅卿,韩春华,王哲,潘洁,孔冬妮,蒋桃珍. 2013

[18]马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析. 杨建德,薛飞,王晓钧,朱远茂,赵立平,吕晓玲,沈荣显,相文华,李景鹏. 2003

[19]H3N8亚型EIVHA基因在昆虫细胞中的表达及生物学特性分析. 刘春国,王伟,刘飞,刘彦云,王丹,吕让,刘明,相文华. 2013

[20]马流感病毒A/马/青海1/94株亚型鉴定及其HA基因序列特征. 王晓钧,贾斌,杨建德,田国斌,薛飞,唐秀英,相文华,沈荣显. 2003

作者其他论文 更多>>

微信小程序