基于TRV病毒的工业大麻(Cannabis sativa L.)VIGS体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘俊飞

作者： 刘俊飞;杨晓娟;潘根;郑建树;黄思齐

作者机构：

关键词： VIGS;工业大麻;PDS;基因功能验证

期刊名称： 中国麻业科学

ISSN： 1671-3532

年卷期： 2023 年 45 卷 005 期

页码： 197-205,214

摘要： 病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术是一种可以通过感染病毒抑制植物内源基因表达的方法,对于验证植物基因的功能非常重要.在工业大麻中,由于其遗传体系尚不稳定,构建和优化工业大麻VIGS体系对于验证部分基因功能具有重要的意义.研究以工业大麻八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturase gene,PDS)作为报告基因,利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)作为载体,注射到工业大麻叶片后观察沉默效果,并对工业大麻VIGS体系进行优化,考察不同侵染方式、侵染的苗龄、目的基因片段、工作液浓度以及农杆菌菌株对沉默效率的影响.结果表明,在1 周龄时采用叶背注射法,侵染菌液浓度为OD600 =1.0,选择GV3101作为农杆菌菌株,使用PDS片段为 960~1259 bp或 126~425 bp,侵染后在 24℃条件下培养 2~3周,可以观察到明显的沉默效果.该结果为进一步研究工业大麻的基因功能及后续的遗传改良和品种改良提供了重要的基础.同时,优化的工业大麻VIGS体系也为其他植物的VIGS研究提供了参考和借鉴.

分类号： S563.3%Q786

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