大麦黄矮病毒(BYDV)cDNA的合成、克隆及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 成卓敏

作者： W.L.Gerlack;P.M.Waterhouse;W.A.Miller;周广和;王立阳

作者机构：

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 1988 年 01 期

页码：

收录情况： 北大核心

摘要： 以大麦黄矮病毒二叉蚜和麦长管蚜专化株的病毒核酸为模板,以小牛胸腺DNA为引物,合成cDNA的第一条链,再用缺口翻译法合成第二条链,然后采用加装BamH_1人工接头的方法将ds-cDNA插入到质粒载体pUC_8中,重组质粒于大肠杆菌JM—83中进行克隆,以克隆的颜色变化选择含有外源DNA的克隆,再用病毒核酸制备的探针筛选真正病毒cDNA插入的克隆。重组质粒中ds-DNA的插入长度在300—1600bp之间。用缺口翻译法制备质粒DNA分子探针检测同源病毒液,反应灵敏度在100pg-1ng之间。应用cDNA探针检测不同病毒和病毒株系,从中筛选出黄矮病毒株系专化克隆系,黄矮病毒专化克隆系和黄矮病毒组专化克隆系.

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