文献类型: 中文期刊
第一作者: 钱平
作者: 钱平;周艳君;童光志;仇华吉;王云峰;吴丹;薛强;陈焕春
作者机构:
关键词: 猪;繁殖能力;呼吸综合征;病毒;ORF6基因;毕赤酵母;基因表达
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2002 年 24 卷 3 期
页码: 161-164
收录情况: CSCD
摘要: 根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5′端的二级结构等特性,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成,然后以正确的读码框架插和到分泌型母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列3′端,构建成酵母转移载体,用化学方法转化酵母菌GS115,和酶切鉴定证实,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中。对重组酵母进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot分析筛选,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌,该重蛋白有免疫学活性,其表达水平可达2.0g/L,而未经改造的ORF6基因则不表达。
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